發(fā)布時(shí)間：2018-11-03 17:24

【摘要】：為探究亮甲酚藍(lán)(BCB)染色選擇的卵母細(xì)胞是否有利于體細(xì)胞核移植胚胎的體外發(fā)育,本實(shí)驗(yàn)將卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體(COCs)放入含有BCB的PBS中染色,根據(jù)細(xì)胞質(zhì)顏色可將卵母細(xì)胞分成BCB~+組和BCB~-組,并以未經(jīng)BCB處理的COCs作為對(duì)照組,然后將卵母細(xì)胞進(jìn)行體外成熟,統(tǒng)計(jì)卵母細(xì)胞的成熟率。將成熟后的卵母細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞核移植,其中,部分BCB~+組卵母細(xì)胞所需的供體細(xì)胞利用Zebularine處理,統(tǒng)計(jì)體細(xì)胞核移植的卵裂率、桑椹胚率和囊胚率。結(jié)果表明:BCB~+組卵母細(xì)胞的成熟率顯著高于對(duì)照組和BCB~-組(71.15%vs 65.38%,53.52%,P0.05);BCB~+組核移植胚胎的卵裂率(87.91%vs 56.83%)、桑椹胚率(37.41%vs 21.73%)和囊胚率(21.48%vs6.82%)均顯著高于BCB~-組(P0.05);與對(duì)照組相比,BCB~+組卵裂率(87.91%vs 83.23%)和囊胚率(21.48%vs14.89%)也顯著升高(P0.05)。BCB~+組供體細(xì)胞經(jīng)Zebularine處理后,胚胎發(fā)育能力進(jìn)一步提高,其中囊胚率顯著高于BCB~+組、對(duì)照組和BCB~-組(29.25%vs 21.48%,14.89%,6.82%,P0.05)。
[Abstract]:In order to investigate whether the oocytes selected by brilliant cresol blue (BCB) staining were beneficial to the development of somatic nuclear transfer embryos in vitro, the cumulus oocyte complex (COCs) was stained in PBS containing BCB. According to cytoplasmic color, oocytes were divided into BCB~ group and BCB~- group, and COCs without BCB treatment was used as control group. The oocytes were matured in vitro to calculate the maturation rate of oocytes. Somatic nuclear transfer was carried out on mature oocytes. The rate of cleavage, morula and blastocyst of somatic nuclear transfer was counted by Zebularine treatment of donor cells needed for some BCB~ oocytes. The results showed that the maturation rate of oocytes in BCB~ group was significantly higher than that in control group and BCB~- group (71.15%vs 65.38). The cleavage rate (87.91%vs 56.83%), morula rate (37.41%vs 21.73%) and blastocyst rate (21.48 vs 6.82%) in BCB~ group were significantly higher than those in BCB~- group (P0.05). Compared with the control group, the cleavage rate (87.91%vs 83.23%) and blastocyst rate (21.48 vs 14.89%) in BCB~ group were significantly higher than those in control group (P0.05). After treated with Zebularine, the embryonic development ability of donor cells in BCB~ group was further improved. The blastocyst rate was significantly higher than that in BCB~ group, control group and BCB~- group (29.25%vs 21.48 and 14.89%, 6.82%, P0.05).
【作者單位】： 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;河北省牛羊胚胎工程技術(shù)研究中心;
【基金】：河北省自然科學(xué)基金(C2014204119) 河北省高等學(xué)校科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(ZD2014002)
【分類號(hào)】：S826

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本文編號(hào)：2308446