【摘要】：【目的】布魯氏菌與宿主相互作用的分子機(jī)制是目前的研究熱點(diǎn)之一,布魯氏菌通過形成來自于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的布氏小體而在巨噬細(xì)胞內(nèi)生存和增殖,其機(jī)制目前尚不清楚,宿主細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)對(duì)病原感染和炎癥的調(diào)控密切相關(guān)。揭示內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)在布魯氏菌感染巨噬細(xì)胞中的作用以及布魯氏菌感染對(duì)巨噬細(xì)胞分泌免疫因子的影響。【方法】構(gòu)建布魯氏菌感染RAW264.7模型,在感染后不同時(shí)間收集細(xì)胞,通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)標(biāo)志分子GRP78和CHOP,以及TNF-α、IL-1β和IL-6在m RNA水平的變化;通過Western blot和ELISA分別檢測(cè)其蛋白水平的變化�！窘Y(jié)果】布魯氏菌感染RAW264.7細(xì)胞的最佳感染復(fù)數(shù)MOI為100?1;證明在布魯氏菌感染4-6 h,巨噬細(xì)胞可殺傷侵入的布魯氏菌,之后存活的細(xì)菌可在細(xì)胞內(nèi)增殖;感染后24 h出現(xiàn)細(xì)胞凋亡,48 h出現(xiàn)大量細(xì)胞壞死。布魯氏菌感染可激活RAW264.7細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng),促進(jìn)GRP78的表達(dá),同時(shí),抑制免疫因子的分泌�！窘Y(jié)論】?jī)?nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)參與了RAW264.7對(duì)布魯氏菌感染的調(diào)節(jié)。
[Abstract]:[objective] the molecular mechanism of the interaction between brucella and its host is one of the hot topics. Brucella survives and proliferates in macrophages through the formation of Brucella bodies from the endoplasmic reticulum. The endoplasmic reticulum stress response of host cells is closely related to the regulation of pathogenic infection and inflammation. To reveal the role of endoplasmic reticulum stress in brucella infection with macrophages and the effect of brucella infection on the secretion of immune factors by macrophages. [methods] the RAW264.7 model of brucella infection was established. The changes of GRP78 and CHOP, TNF- 偽, IL-1 尾 and IL-6 at the level of m RNA were detected by real-time fluorescence quantitative PCR. The protein level was detected by Western blot and ELISA. [results] the best complex number MOI of Brucella infection in RAW264.7 cells was 100g / 1; The results showed that the macrophages could kill the invasive brucellosis for 4-6 hours, and the surviving bacteria could proliferate in the cells, apoptosis appeared at 24 h after infection, and a large number of cell necrosis occurred at 48 h after infection. Brucella infection can activate the endoplasmic reticulum stress response of RAW264.7 cells, promote the expression of GRP78, and inhibit the secretion of immune factors. [conclusion] endoplasmic reticulum stress response is involved in the regulation of brucella infection by RAW264.7.
【作者單位】： 西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院農(nóng)業(yè)部動(dòng)物生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31672584) 陜西省科技統(tǒng)籌創(chuàng)新工程計(jì)劃項(xiàng)目(No.2016TZC-N-13-5)~~
【分類號(hào)】：S852.614

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本文編號(hào)：2296094