【摘要】：PRRSV仍然是危害生豬養(yǎng)殖業(yè)的重大疫病之一,給全世界的生豬養(yǎng)殖業(yè)造成重大的經(jīng)濟損失。PRRSV感染引起母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎或木乃伊胎以及返情等繁殖障礙問題,公豬精液帶毒,各生產(chǎn)階段的豬均可出現(xiàn)呼吸道癥狀。感染豬體內(nèi)持續(xù)的病毒血癥與臨床癥狀嚴(yán)重程度有相關(guān)性,帶毒動物可排毒傳染周圍的易感動物,妊娠母豬處于病毒血癥期可發(fā)生垂直傳播導(dǎo)致胚胎先天感染PRRSV。泰萬菌素為泰樂菌素的衍生物,已被多項研究證實可抑制PRRSV的復(fù)制,為新一代的獸用抗病毒藥物。本研究從體外細胞實驗、人工感染豬的病毒血癥變化、攻毒保護試驗、市場推廣應(yīng)用等方面研究泰萬菌素防控PRRS的機理和應(yīng)用,為生豬養(yǎng)殖業(yè)使用該藥物防控PRRSV提供參考。體外實驗采用0μg/ml、0.1μg/ml、1.0μg/ml、10μg/ml、50μg/ml的泰萬菌素孵育Marc145細胞,每個濃度梯度設(shè)立接種PRRSV組和對照組,接毒組按1%劑量接種PRRSV CH-1r株毒液。試驗結(jié)果表明,泰萬菌素對Marc145無細胞毒性,不影響細胞生長,泰萬菌素孵育的接毒組對應(yīng)TCID_(50)分別為10~(7.22)、10~(6.62)、10~(6.26)、10~(4.68)、10~(2.52)、空白對照組的TCID_(50)為0,泰萬菌素在1.0μg/ml濃度時可見PRRSV的CPE減少,泰萬菌素50μg/ml濃度能很好的抑制PRRSV復(fù)制,與Stuart、M Takagi、Zhao z等人的體外實驗結(jié)果相一致,本實驗發(fā)現(xiàn)泰萬菌素能抑制PRRSV CH-1r毒株復(fù)制,且濃度越高抑制PRRSV復(fù)制的能力越強。體內(nèi)試驗為驗證泰萬菌素對PRRSV人工感染豬的病毒血癥的影響,將經(jīng)ELISA和PCR檢測雙陰性的仔豬分A、B和C組3組,A組口服150ppm泰萬菌素,試驗第7天攻毒,A組和B組試驗動物分別肌注和滴鼻3ml 10~(5.0) TCID_(50)/m L PRRSV JXA-1株,C組滴鼻和注射等量的生理鹽水,攻毒后第0、3、5、7、10、14、21日采血實時熒光RT-PCR檢測血液中的PRRSV病毒拷貝數(shù),給藥組攻毒后第3天檢測血液中病毒拷貝數(shù)為0,而陽性對照組在攻毒3天后血液病毒拷貝數(shù)達到104,第5天達到最高峰108.5,之后逐漸下降,陰性對照組無病毒血癥出現(xiàn)。試驗結(jié)果表明泰萬菌素在體內(nèi)可抑制PRRSV病毒復(fù)制,減少感染豬PRRSV的病毒血癥或縮短PRRSV病毒血癥持續(xù)時間。攻毒保護試驗是將ELISA和PCR檢測雙陰性的25日齡斷奶仔豬15頭分為A、B、C三組,A組口服給藥泰萬菌素150ppm,B組為陽性對照,C空白對照。藥物組給藥7天后和陽性對照組同時分別肌注和滴鼻3ml 10~(5.0) TCID_(50)/ml的PRRSV JXA-1毒株,攻毒當(dāng)天計為第0天,攻毒后連續(xù)21天測量直腸體溫,觀察各組仔豬的食欲變化,精神狀態(tài)以及是否死亡;第-7、0、7、14、21天整組稱重,對比各組體重增加值和日增重(ADG)。試驗過程中如有死亡立即解剖,其余動物在試驗結(jié)束時安樂死解剖觀察臟器病變,并統(tǒng)計肺部病變計分。結(jié)果顯示A組僅在攻毒第0-2天有發(fā)熱,第3天基本恢復(fù)正常,B組第3-10天體溫急劇升高,其中2頭仔豬(B1和B5)分別在第11天和12天死亡。肺部病變計分A、B、C三組的平均分分別為16.4、53.2、12.2。田間試驗結(jié)果顯示目前該藥物臨床主要應(yīng)用于保育豬和育肥豬的呼吸道疾病預(yù)防保健,減少仔豬的死淘率,以及母豬妊娠階段和哺乳階段使用降低農(nóng)場流產(chǎn)率和返情率。獲得發(fā)明專利的英國伊科動保集團在全球市場泰萬菌素的銷售額以11%年增長,在中國以18%年增長。總之,體外Marc145細胞試驗表明泰萬菌素可抑制PRRSV的復(fù)制,病毒TCID_(50)降低,口服泰萬菌素150ppm攻毒后第3天抽血檢測病毒血癥為0,口服給藥150ppm泰萬菌素后攻毒JXA-1株的保護試驗表明僅攻毒后2天內(nèi)有輕微發(fā)熱、精神沉郁和食欲降低現(xiàn)象,藥物組A的日增重高于接毒陽性對照組B和空白對照組C。表明泰萬菌素可用于田間控制PRRSV感染,起到抑制PRRSV復(fù)制,減少PRRSV病毒血癥或縮短PRRSV病毒血癥周期,有利于減少感染動物的死亡率和減輕臨床癥狀。
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【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S858.28

【參考文獻】

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本文編號：2281615