發(fā)布時(shí)間：2018-10-16 15:45

【摘要】：旨在探討豬去分化脂肪細(xì)胞(DFAT)再分化過程中Krüppel樣因子2(KLF2)和過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)的表達(dá)模式,為揭示豬DFAT細(xì)胞再分化機(jī)制奠定基礎(chǔ)。采集豬成熟脂肪細(xì)胞,經(jīng)"天花板"培養(yǎng)法獲得DFAT細(xì)胞,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)表面抗原,形態(tài)學(xué)和油紅O染色提取法檢測(cè)成脂分化程度,Real-time PCR檢測(cè)KLF2和PPARγmRNA的表達(dá)。結(jié)果表明,豬成熟脂肪細(xì)胞接種第3天,可見明顯的去分化跡象,即細(xì)胞形成犄角狀突起,大脂滴分解成小脂滴并向細(xì)胞外排出脂滴,接種至第9天脂滴基本排出完畢,接種至第12天原代細(xì)胞長滿底壁;間充質(zhì)干細(xì)胞表面抗原CD29、CD44和CD105的陽性表達(dá)率分別達(dá)到99.0%、97.8%和99.5%,而造血干細(xì)胞表面抗原CD45和CD34的表達(dá)僅為3.55%和4.55%;將F3代細(xì)胞成脂誘導(dǎo)3d,胞質(zhì)中出現(xiàn)脂滴,并隨誘導(dǎo)時(shí)間增加,脂滴數(shù)量增多,體積增大,誘導(dǎo)至12d誘導(dǎo)率達(dá)80%以上;成脂誘導(dǎo)2、5、10和15d時(shí),KLF2mRNA的相對(duì)表達(dá)量分別為0.47±0.02、0.35±0.07、0.31±0.09和0.11±0.07,PPARγmRNA的相對(duì)表達(dá)量分別為1.62±0.01、2.03±0.04、3.22±0.04和3.49±0.06。本研究成功獲得高純度的DFAT細(xì)胞,具有間充質(zhì)干細(xì)胞特性和成脂再分化能力;KLF2 mRNA的表達(dá)在成脂分化過程中隨誘導(dǎo)時(shí)間的增加而減少,而PPARγmRNA的表達(dá)量隨誘導(dǎo)時(shí)間的延長逐步增加;表明KLF2在DFAT細(xì)胞的成脂再分化過程中可能發(fā)揮抑制作用,而PPARγ可能會(huì)發(fā)揮促進(jìn)作用。
[Abstract]:The aim of this study was to investigate the expression patterns of Peppel-like factor 2 (KLF2) and peroxidase proliferator-activated receptor (CDR3) in the redifferentiation of porcine dedifferentiated adipocytes (DFAT), and lay a foundation for revealing the differentiation mechanism of DFAT cells in pigs. Porcine mature adipocytes were collected, DFAT cells were obtained by "Ceiling" culture, surface antigen, morphology and oil-red O staining were detected by flow cytometry to detect the degree of lipid differentiation. Real-time PCR was used to detect the expression of KLF2 and Jurkat mRNA. The results showed that the mature fat cells of pigs were inoculated on day 3, and there were obvious signs of dedifferentiation, that is, the cells were formed into small angle-shaped protrusions, the big fat drops were decomposed into small fat drops and the fat drops were discharged out of the cells, and the lipid droplets inoculated to day 9 were basically discharged, and the primary cells inoculated to the 12th day were overgrown with the bottom wall. The positive expression rates of CD29, CD44 and CD105 were 99. 0%, 97. 8% and 99. 5%, respectively, while the expression of CD45 and CD34 in hematopoietic stem cells was only 3.55% and 4.55%. The relative expressions of KLF2mRNA were 0. 47, 0. 02, 0. 35, 0. 07, 0. 31, 0. 09 and 0. 11, 0. 07, 0. 31, 0. 09 and 0. 11, 0. 07, 0. 31, 0. 09 and 0. 11, 0. 07, 0. 31, 0. 09 and 0. 11, 0. 07, 3. 22, 0. 04 and 3. 49, 0. 06, respectively. The results showed that the expression of KLF2 mRNA decreased with the increase of induction time in the process of lipodifferentiation, while the expression of KLF2 mRNA increased with the increase of induction time. It was suggested that KLF2 might play an inhibitory role in the process of fat redifferentiation of DFAT cells, and the effect of KLF2 could play a role in promoting the differentiation of FAT cells.
【作者單位】： 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31372392)
【分類號(hào)】：S828

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉寒;李蘇;趙玉華;王衛(wèi)民;;PPARα和PPARγ的克隆表達(dá)研究進(jìn)展[J];中國農(nóng)學(xué)通報(bào);2013年14期

2 徐世文;櫻桃;李術(shù);;PPAR-γ功能的研究進(jìn)展[J];東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2011年09期

3 錢云霞;楊孫孝;梁洪;錢倫;錢凱先;;鱸PPARγ基因的克隆、組織表達(dá)及其抗體制備[J];水產(chǎn)學(xué)報(bào);2010年08期

4 金曉輝;魏孝義;黃志偉;吳東海;;水翁花提取物的PPARγ配體活性鑒定[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年21期

5 許恒勇,王繼文;PPAR基因進(jìn)化及其在脊椎動(dòng)物發(fā)育過程中的表達(dá)[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2005年09期

6 馬云;王云云;張曉婷;李芬;王啟釗;王新莊;;鴨PPARα基因結(jié)構(gòu)及功能的生物信息學(xué)分析[J];浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版);2011年04期

7 魯晶;劉玉蘭;石君霞;郭廣倫;;PPARγ對(duì)炎癥的調(diào)控作用[J];畜牧與獸醫(yī);2007年11期

8 王娉;王啟貴;李輝;張富春;;雞PPAR-γ基因表達(dá)載體構(gòu)建及抗血清制備[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);2007年07期

9 蔣金航;馬云;王新莊;;PPARγ基因調(diào)控脂肪細(xì)胞分化的研究進(jìn)展[J];中國畜牧雜志;2014年09期

10 ;Regulatory Expression of Peroxisome Proliferator Activated Receptors Genes During Fatty Liver Formation in Geese[J];Agricultural Sciences in China;2010年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 ;Genetic polymorphisms of PPAR-γ,HHEX,PTPRD,KCNQ1,and SRR affect therapeutic efficacy of Pioglitazone in Chinese Patients with type 2 diabetes[A];傳承與發(fā)展，創(chuàng)湖南省生理科學(xué)事業(yè)的新高——湖南省生理科學(xué)會(huì)2011年度學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要匯編[C];2011年

2 ;Dynamic analysis and ligand binding affinity investigation of PPAR mutations[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)2003年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要集[C];2003年

3 童南偉;;過氧化物酶增殖物激活受體(PPAR)a與脂質(zhì)代謝[A];全國首屆代謝綜合征的基礎(chǔ)與臨床專題學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

4 王偉銘;章慧娣;劉峰;陳佳韻;陳楠;;PPARγ活化對(duì)腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞的作用研究[A];2007年浙滬兩地腎臟病學(xué)術(shù)年會(huì)資料匯編[C];2007年

5 陳剛;林新富;梁繼興;林麗香;沈曉麗;;過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)基因多態(tài)性與老年男性骨質(zhì)疏松癥相關(guān)性研究[A];2008內(nèi)分泌代謝性疾病系列研討會(huì)暨中青年英文論壇論文匯編[C];2008年

6 陳剛;林新富;梁繼興;林麗香;沈曉麗;;過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)基因多態(tài)性與老年男性骨質(zhì)疏松癥相關(guān)性研究[A];2008中國醫(yī)師協(xié)會(huì)內(nèi)分泌代謝科醫(yī)師分會(huì)年會(huì)論文匯編[C];2008年

7 李潔;戴愛國;胡瑞成;朱黎明;王梅芳;;PPARγ影響γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶活性及表達(dá)在大鼠慢性阻塞性肺疾病中的作用[A];中國生理學(xué)會(huì)第23屆全國會(huì)員代表大會(huì)暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要文集[C];2010年

8 管又飛;;脂質(zhì)過氧化物體增殖物激活受體γ(PPAR γ)與糖尿病腎病[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)腎臟學(xué)分會(huì)2004年年會(huì)暨第二屆全國中青年腎臟病學(xué)術(shù)會(huì)議專題講座匯編[C];2004年

9 孫莉;尚進(jìn)林;梁浩;程焱;;PPAR全激動(dòng)劑對(duì)小鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[A];第十一屆全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

10 ;Endothelial PPARγmediates anti-inflammatory actions of rosiglitazone through dissociation of NF-κB[A];中國生理學(xué)會(huì)心血管生理學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前3條

1 徐錚奎;發(fā)現(xiàn)PPAR拮抗劑[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2012年

2 曾凡新邋林敏;PPAR激動(dòng)劑類抗糖尿病藥研發(fā)喜憂參半[N];中國醫(yī)藥報(bào);2007年

3 袁松范;開發(fā)PPAR多通道激動(dòng)劑須謹(jǐn)慎[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉炳婷;SUMO特異性蛋白酶1調(diào)控脂肪形成的作用及分子機(jī)制[D];上海交通大學(xué);2014年

2 陳宏;巨噬細(xì)胞PPARγ對(duì)皮膚傷口愈合的作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 韓晶;PPARγ在腦缺血再灌注損傷和過氧化氫損傷中的調(diào)控機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2014年

4 張巖;PPARα/γ信號(hào)通路在高脂性脂肪性肝炎發(fā)病機(jī)制中的作用研究[D];蘇州大學(xué);2015年

5 張鷗;阿托伐他汀對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化患者外周血中PPAR γ的作用研究及相關(guān)炎癥因子與動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)系的建模分析[D];鄭州大學(xué);2016年

6 周毅;PPARγ介導(dǎo)的抗氧化機(jī)制在血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化中作用和機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2016年

7 滕志朋;PPARβ/δ在大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中的作用及其機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

8 佟強(qiáng);PPARβ/δ激活在帕金森病中的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2016年

9 王伶;高靜水壓刺激對(duì)血小板活化的影響及PPARγ的保護(hù)作用的研究[D];南昌大學(xué);2008年

10 孫晶;PPARγ1對(duì)系膜細(xì)胞外基質(zhì)生成的抑制作用及其機(jī)制[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 曹智麗;過氧化物酶增殖物激活受體α（PPARα）在大鼠酒精性肝病發(fā)生過程中的變化[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 宋石;miR-27a通過靶向調(diào)控PPARγ對(duì)酒精誘導(dǎo)大鼠BMSC分化的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

3 鄒佳楠;PPAR-γ在IgA腎病發(fā)生中的作用及其機(jī)理研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 陶曉燕;PPAR δ激動(dòng)劑和siRNA對(duì)大鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞及成骨細(xì)胞分化和礦化的作用研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

5 于飛;新型PPARγ激動(dòng)劑對(duì)人腎癌細(xì)胞增殖抑制及其機(jī)制的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2015年

6 何修界;PPARγ激活對(duì)GDM小鼠胎盤脂肪酸運(yùn)輸?shù)鞍妆磉_(dá)水平的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

7 魏璇;PPARγ通過對(duì)RUVBL2表達(dá)調(diào)控影響脂聯(lián)素分泌的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

8 游潔冰;PPARγ激動(dòng)劑、胰島素通過上調(diào)負(fù)性炎性因子TIPE2的表達(dá)抑制高糖、Aβ1-40引起的炎性反應(yīng)及神經(jīng)細(xì)胞調(diào)亡[D];山東大學(xué);2015年

9 劉常為;CTGF、COL-I、PPARγ在卵巢細(xì)胞外基質(zhì)的表達(dá)及與多囊卵巢綜合征的關(guān)系[D];暨南大學(xué);2015年

10 曹小潔;TLR4通過PPARγ下調(diào)ABCG1表達(dá)促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)炎癥反應(yīng)及脂質(zhì)沉積[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：2274831