【摘要】：酸馬奶是蒙古族特色的乳飲料,具有多種醫(yī)療保健作用,已成為許多疾病最佳的天然輔助治療乳飲料。目前研究較多的是酸馬奶中的野生菌株及菌株的代謝產(chǎn)物,而從酸馬奶中整體研究其微生物代謝產(chǎn)物的報道較少。關于酸馬奶或其野生菌株代謝產(chǎn)物對牛源野生致病性大腸桿菌作用的報道局限于體外抑菌,而對致病性大腸桿菌體內抑菌機理和模型小鼠腸黏膜免疫屏障功能影響的報道幾乎未見。因此,研究選擇內蒙古錫林浩特地區(qū)酸馬奶原液和不同比例(1/2、1/4、1/8、1/10)的增菌溶液作為試驗樣品,采用有機溶劑乙酸乙酯溶媒提取法提取酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物,采用牛津杯法和二倍稀釋法揭示酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物對致病性大腸桿菌的抑菌效果,通過體內抗菌試驗探究酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物對致病性大腸桿菌的治療效果,同時對酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物的成分進行了初步的分析。通過體外抑菌試驗探究酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物對6種致病性病原菌的抑菌效果,初步確定其抗菌譜。另外,探討酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物對致病性大腸桿菌細胞表面特性的影響及抑菌機理,闡述酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物對感染致病性大腸桿菌小鼠腸黏膜免疫屏障功能的影響。試驗結果表明：(1)有機溶劑乙酸乙酯溶媒提取法可提取酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物,確定pH 2是酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物提取最佳pH值。(2)通過牛津杯法和二倍稀釋法兩種體外抑菌方法可得出酸馬奶及不同比例(1/2、1/4、1/8、1/10)增菌溶液(未滅菌-W和滅菌-M牛奶)微生物代謝產(chǎn)物可抑制致病性大腸桿菌O8的生長,其中酸馬奶原液的抑菌效果最好,抑菌直徑為28.261mm,MIC、MBC分別為0.031mg/mL和0.063mg/mL,未滅菌牛奶1/2比例(1/2-W)和滅菌牛奶1/2(1/2-M)比例次之,抑菌直徑分別為24.27mm和24.48 mm, MIC、MBC分別為0.055mg/mL、0.219mg/mL和0.058mg/mL、0.231mg/mL(3)通過小鼠體內抗菌試驗可知,致病性大腸桿菌08的濃度在75×1010-3.8×1010CFU/mL時,小鼠死亡率達到80%,為80% MLD。酶標儀測得其OD值在1.30-1.35之間。(4)酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物對感染致病性大腸桿菌08的小鼠具有保護作用,保護率高達62.5%,接近鹽酸環(huán)丙沙星的保護率。酸馬奶原液、1/2-W、1/4-W、1/2-M、1/8-M對小鼠的最佳抗菌劑量分別為1.0mg/mL、0.88mg/mL、1.03mg/mL、0.93mg/mL、1.5m g/mL。(5)酸馬奶原液、1/2-W和1/2-M均含有蛋白質和有機酸,其中蛋白質含量占酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物干物質的50%左右。酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物至少由12種氨基酸組成,且其含量以谷氨酸、酪氨酸和胱氨酸相對較高。酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物含有10種有機酸,其含量相差較大。(6)酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物對腸出血性大腸埃希氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、無乳鏈球菌6種致病性病原菌均有抑菌作用,抑菌直徑分布于25～31mm之間,MIC在0.03 mg/mL左右,MBC相對較分散,在0.2-0.5mg/mL之間變動。(7)酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物通過干預細菌細胞壁的通透性和細胞膜的滲透性,降低細菌細胞表面的疏水性而增加親水性來抑制致病性大腸桿菌O8的生長,其作用效果與鹽酸環(huán)丙沙星相當。(8)酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物提高模型小鼠的免疫臟器指數(shù)和單核-巨噬細胞的吞噬功能,增強模型小鼠的免疫力和單核巨噬細胞的吞噬能力,其中酸馬奶原液和1/2-W的效果最好。(9)酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物能顯著提高模型小鼠的腸黏膜免疫功能。酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物顯著提高模型小鼠血液中IL-2、IL-10和IFN-y的濃度,顯著降低IL-6和TNF-a的濃度,顯著增強IgA、IgG、IgM的水平。以上結果表明,酸馬奶微生物代謝產(chǎn)物通過干預動物腸黏膜免疫屏障的腸淋巴組織、上皮細胞間淋巴細胞、固有層中彌散分布的淋巴細胞以及全身淋巴細胞、淋巴組織合成和分泌IL-2、IL-10、IFN-γ、IL-6和TNF-α等細胞因子來提高機體的免疫功能,降低炎癥損傷,消滅病原微生物。另外,未滅菌牛奶1/2和滅菌牛奶1/2比例酸馬奶增菌溶液微生物代謝產(chǎn)物的抑菌效果接近酸馬奶原液微生物代謝產(chǎn)物。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：內蒙古農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S852.61

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 姚媛媛;王純潔;敖日格樂;;傳統(tǒng)蒙藥復方巴布-7對致犢牛腹瀉病大腸桿菌體外作用的研究[J];當代畜牧;2014年32期

2 查哈達;酸馬奶治療肺結核56例臨床觀察[J];中國民族民間醫(yī)藥雜志;1999年01期

3 母智森,白英;酸馬奶[J];內蒙古農業(yè)大學學報(自然科學版);2003年01期

4 王瑞珍;;酸馬奶的營養(yǎng)成分與保健特性[J];養(yǎng)殖技術顧問;2012年10期

5 任秀娟;趙一萍;布仁其其格;芒來;;酸馬奶的營養(yǎng)價值和產(chǎn)業(yè)化發(fā)展探究[J];內蒙古科技與經(jīng)濟;2014年03期

6 陳光明;李巨銀;劉海軍;;凬草等4種中草藥對豬大腸桿菌的體外抗菌研究[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2014年23期

7 殷文政,劉立一,馬玉玲,胡煒東;馬奶酒抑菌活性的研究[J];中國乳品工業(yè);2005年07期

8 孫天松,孟和畢力格,王俊國,陳永福,趙電波,張和平;新疆維吾爾自治區(qū)酸馬奶化學組成分與微生物學分析[J];中國乳品工業(yè);2005年10期

9 楊茉莉,樊凌翰;馬奶成分分析及開發(fā)利用現(xiàn)狀[J];陜西農業(yè)科學(自然科學版);2001年01期

10 孟濤,郭興華;乳酸菌及其生長因子對人畜健康的作用[J];生物工程進展;1993年04期

相關博士學位論文 前1條

1 賀銀鳳;酸馬奶酒中微生物的分離鑒定及抗菌因子的研究[D];內蒙古農業(yè)大學;2008年

相關碩士學位論文 前1條

1 高娃;牛源致病性大腸桿菌感染小鼠腸道模型的建立及蒙藥的治療研究[D];內蒙古農業(yè)大學;2012年

，

本文編號：2270842