【摘要】：大腸埃希氏菌(Escherichia coli)簡稱大腸桿菌,是人和動(dòng)物腸道中最豐富的一種細(xì)菌。大腸桿菌多數(shù)菌株不具有致病性,但在一定條件下可引起腸道外感染。而某些血清型菌株致病力強(qiáng),可引起人和多種動(dòng)物的疾病,常常導(dǎo)致腹瀉和敗血癥,并可發(fā)生致死性感染。臨床上使用抗生素進(jìn)行大腸桿菌病的治療,但近年來隨著抗生素的大量運(yùn)用,多重耐藥大腸桿菌菌株日益增多,給人和動(dòng)物的安全帶來了極大隱患。為掌握四川省規(guī)�；i場(chǎng)大腸桿菌的耐藥特性,本研究對(duì)采集于四川省多個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)的樣品進(jìn)行了大腸桿菌的分離鑒定和耐藥性分析,對(duì)氟喹諾酮耐藥細(xì)菌進(jìn)行了耐藥基因的檢測(cè),為四川省規(guī)�；i場(chǎng)大腸桿菌病毒防控提供了科學(xué)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。1、規(guī)�；i場(chǎng)大腸桿菌的分離與鑒定在四川省規(guī)�；i場(chǎng)采集發(fā)病豬的糞便或肝臟等組織樣品,采用常規(guī)細(xì)菌分離技術(shù)分離發(fā)病豬組織中的大腸桿菌,通過形態(tài)學(xué)、培養(yǎng)特性和生化特性對(duì)分離菌進(jìn)行鑒定。使用小鼠作為動(dòng)物模型,對(duì)分離均進(jìn)行致病力分析,結(jié)果鑒定出198株大腸桿菌,其中26株分離均具有致病性,腹腔感染小鼠后可引起小鼠死亡。2、198株大腸桿菌對(duì)9種非喹諾酮和9種喹諾酮藥物的耐藥性分析按照CLSI推薦的Kirby-Bauer法,進(jìn)行18種抗菌藥物的藥敏試驗(yàn),結(jié)果顯示,非喹諾酮藥物中氟苯尼考耐藥率最高為94.95%(188/198),阿米卡星耐藥率最低為23.23%(46/198)；喹諾酮藥物中恩諾沙星耐藥率最高為87.88%(174/198),左氧氟沙星耐藥率最低為71.21%(141/198)。不同地區(qū)分離的大腸桿菌耐藥性有差異。分離自不同地區(qū)的耐藥率也有差異,多重耐藥率比較高,15、16、17重耐藥最為嚴(yán)重,分別有26、32和38株。3、198株大腸桿菌喹諾酮耐藥基因的檢測(cè)根據(jù)喹諾酮耐藥基因序列設(shè)計(jì)擴(kuò)增qnr A、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、aac(6')-Ib、 qepA等基因的引物對(duì)所有分離菌進(jìn)行耐藥基因的PCR檢測(cè)。結(jié)果顯示,198株分離菌株均沒有檢測(cè)出qnrC基因,qnrA基因檢出率11.11%(22/198),qnrB基因檢出率7.58%(15/198),qnrS基因檢出率9.09%(18/198),qnrD基因檢出率1.01%(2/198), aac(6')-Ib-cr基因檢出率12.12%(24/198), qepA基因檢出率4.04%(8/198)。以上研究結(jié)果顯示四川省規(guī)�；i場(chǎng)中豬源大腸桿菌耐藥性嚴(yán)重且存在多重耐藥現(xiàn)象。四川省豬源大腸桿菌喹諾酮耐藥性與質(zhì)粒介導(dǎo)的qnrA、qnrB、qnrS、qnrD、aac(6')-Ib-cr及qepA基因有關(guān)。
[Abstract]:Escherichia coli (Escherichia coli) is one of the most abundant bacteria in human and animal intestines. Most strains of Escherichia coli are not pathogenic, but can cause extraintestinal infection under certain conditions. Some serotype strains are virulent and can cause human and many animal diseases, often lead to diarrhea and septicemia, and can cause fatal infection. Clinical use of antibiotics for the treatment of Escherichia coli disease, but in recent years with the use of a large number of antibiotics, multi-drug resistant Escherichia coli strains are increasing, to the safety of humans and animals has brought great hidden danger. In order to understand the drug resistance characteristics of Escherichia coli in large-scale pig farms in Sichuan Province, the Escherichia coli isolates and drug resistance analysis were carried out in several large-scale pig farms in Sichuan Province. The resistance genes of fluoroquinolone-resistant bacteria were detected. Scientific experimental data were provided for the prevention and control of Escherichia coli virus in large-scale pig farms in Sichuan Province. 1. Isolation and identification of E. coli from large-scale pig farms in Sichuan Province were conducted to collect feces or liver samples of infected pigs. E. coli isolated from infected pig tissues was isolated by routine bacterial isolation technique. The isolated bacteria were identified by morphology, culture and biochemical characteristics. Using mice as animal model, 198 strains of Escherichia coli were identified, of which 26 strains were pathogenicity. The drug resistance of 2198 strains of Escherichia coli to 9 kinds of non-quinolones and 9 quinolones were tested by Kirby-Bauer method recommended by CLSI. The results showed that 2198 strains of Escherichia coli were resistant to 9 kinds of non-quinolones and 9 kinds of quinolones. Among non-quinolones, the highest resistance rate of florfenicol was 94.95% (1888 / 198), the lowest resistance rate of amikacin was 23.23% (46 / 198), the highest resistance rate of enrofloxacin was 87.88% (174 / 198), and the lowest resistance rate of levofloxacin was 71.21% (141198). The drug resistance of Escherichia coli was different in different regions. There were also differences in drug resistance rates between different regions, and the multidrug resistance rate was higher, and the most serious was 15C16 / 17. 3198 strains of Escherichia coli quinolone resistance genes were amplified by primers of qnr AqnrBnrBnnrBPQnrDnnrDnnrSnSAAC (6')-Ib, qepA and other genes, respectively. 3198 strains of Escherichia coli were tested by PCR for their resistance genes according to the sequence of quinolone resistance genes. The results showed that qnrC gene was not detected in all the 198-isolated strains, and the detection rate of qnrA gene was 11.11% (22 / 198), qnrB gene 7.58% (15 / 198), qnrS) 9.09% (18 / 198), aac (6') -Ib-cr 12.12% (24 / 198), qepA) 4.04% (8 / 198). The detection rate of), qnrD gene was 1.01% (2 / 198), aac (6') and the detection rate of Ib-cr gene was 12.12% (24 / 198), qepA). The results showed that the drug resistance of Escherichia coli was serious and multidrug resistance existed in large-scale pig farms in Sichuan Province. The resistance of Sichuan porcine Escherichia coli to quinolone is related to plasmid mediated qnrA,qnrB,qnrS,qnrD,aac (6')-Ib-cr and qepA genes.
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S852.61

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4 劉e，

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