【摘要】：隱孢子蟲(Cryptosporidium)是一種全球流行的重要人獸共患寄生原蟲,具有廣泛的宿主。隱孢子蟲病目前是僅次于輪狀病毒的第二大致腹瀉疾病,每年有80萬5歲以下兒童死于隱孢子蟲引起的腹瀉。盡管許多學(xué)者對(duì)其生物學(xué)特性、致病機(jī)理、免疫和基因組學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域進(jìn)行了研究,也取得了顯著的成績,但仍存在很多的問題和不足,隱孢子蟲病至今尚無有效的治療藥物和疫苗。本研究對(duì)JVAP18S、Csp18S和CRU18S 3種隱孢子蟲TaqMan實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法的敏感性、特異性和重復(fù)性進(jìn)行了比較。結(jié)果顯示,3種方法均能有效檢測(cè)隱孢子蟲,其中JVAP18S法敏感性更高、特異性更強(qiáng)、重復(fù)性更好,適合于動(dòng)物糞便中隱孢子蟲卵囊的定量檢測(cè)。ICR小鼠人工感染泰澤隱孢子蟲后,第3 d開始排出卵囊,第9 d達(dá)高峰,21 d出現(xiàn)第二個(gè)高峰,至30 d仍有排出。構(gòu)建了泰澤隱孢子蟲子孢子表面抗原CP15基因的原核表達(dá)載體,實(shí)現(xiàn)了該基因的可溶表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物具有良好的免疫活性,其免疫血清與微小隱孢子蟲抗原存在交叉反應(yīng)。對(duì)rCP15、rCpSushi、rCP41制備的亞單位疫苗,以及pVAX-CpCTL10、pVAX-TH10和pVAX-CP15 3種核酸疫苗對(duì)ICR小鼠的免疫保護(hù)效果進(jìn)行了比較。結(jié)果顯示,6種疫苗均誘導(dǎo)產(chǎn)生了特異性的體液和細(xì)胞免疫反應(yīng),小鼠血清IgG抗體,IL-4、IL-17、INF-γ和TNF細(xì)胞因子,CD4+和CD8+淋巴細(xì)胞含量,以及脾淋巴細(xì)胞增值水平均有不同程度的提高。人工感染后各免疫組小鼠排卵囊量顯著減少,其中pVAX-CpCTL10、rCP41和rCpSushi組減卵率分別達(dá)58.34%、53.78%和51.52%,表明6組疫苗免疫均對(duì)小鼠隱孢子蟲感染有良好的保護(hù)效果。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S855.9

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2243359