【摘要】：本研究將巨型艾美耳球蟲Emgam56基因去除信號(hào)肽后的ORF序列連接至pET-28a(+)載體,構(gòu)建表達(dá)載體pET-28-Emgam56,轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌大腸桿菌BL21(DE3),經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá);分析表達(dá)產(chǎn)物的可溶性和重組蛋白的分子相對(duì)質(zhì)量,并進(jìn)一步鑒定重組配子體蛋白rEmGAM56的抗原性。SDS-PAGE分析表明,表達(dá)載體能表達(dá)56000左右蛋白質(zhì),主要以可溶性蛋白的形式存在;Western blot檢測(cè)表明,rEmGAM56蛋白能被鼠抗rEmGam56多克隆抗體和巨型艾美耳球蟲感染雞的康復(fù)血清特異性識(shí)別,顯示重組蛋白具有良好的抗原性。本研究結(jié)果為研制重組配子體抗原亞單位疫苗奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In this study, the ORF sequence of Emgam56 gene was ligated to pET-28a () vector, and the expression vector pET-28-Emgam56, was transformed into E. coli BL21 (DE3), which was induced by IPTG. The soluble expression product and the molecular weight of the recombinant protein were analyzed, and the antigenicity of recombinant gametophyte protein rEmGAM56 was further identified. SDS-PAGE analysis showed that the expression vector could express about 56000 proteins. The results of Western blot analysis showed that rEmGAM56 protein could be specifically recognized by the rehabilitation serum of mice against rEmGam56 polyclonal antibody and Eimeria megamelliae infected chicken, which showed that the recombinant protein had good antigenicity. The results laid a foundation for the development of recombinant gametophyte antigen subunit vaccine.
【作者單位】： 揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院江蘇省動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金資助項(xiàng)目(20123250110002) 江蘇省屬高校自然科學(xué)基金重大資助項(xiàng)目(11KJA230002) 江蘇省高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目
【分類號(hào)】：S852.7

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本文編號(hào)：2235249