【摘要】：為建立EBOV抗體間接ELISA檢測方法,以純化后的EBOV糖蛋白作為包被抗原,HRP標記山羊抗馬IgG為二抗,EBOV陽性馬血清和陰性馬血清分別為陽、陰性對照,優(yōu)化反應條件,以EBOV病毒樣顆粒免疫獲得的高免馬血清評價其特異性和敏感性,并將檢測結果與基于假病毒的中和抗體檢測結果相比較,進一步評價EBOV抗體ELISA檢測方法在EBOV免疫血清抗體水平檢測中的應用。優(yōu)化后的間接ELISA方法可特異性檢測EBOV抗體,與西尼羅病毒等的陽性血清均不發(fā)生反應,檢測結果與基于假病毒的中和抗體檢測結果相平行。批內、批間試驗變異系數(shù)均小于8%。本研究成功建立了EBOV抗體間接ELISA檢測方法,為EBOV免疫血清抗體水平檢測提供了一種簡便、快速的檢測方法。
[Abstract]:In order to establish an indirect ELISA detection method for EBOV antibody, the purified EBOV glycoprotein was used as the coated antigen to label goat anti-EBOV positive horse serum and negative equine serum as positive and negative control respectively, and the reaction conditions were optimized. The specificity and sensitivity of EBOV virus-like immunized high immune horse serum were evaluated, and the results were compared with those of neutralizing antibody based on pseudovirus. To further evaluate the application of EBOV antibody ELISA assay in the detection of EBOV immune serum antibody. The optimized indirect ELISA method can specifically detect EBOV antibody, but does not react with the positive serum of West Nile virus, which is parallel to the result of neutralizing antibody detection based on pseudovirus. The coefficient of variation was less than 8. In this study, the indirect ELISA detection method of EBOV antibody was successfully established, which provided a simple and rapid method for the detection of antibody level of EBOV immunized serum.
【作者單位】： 中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院軍事獸醫(yī)研究所吉林省人獸共患病預防與控制重點實驗室;江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;吉林大學動物醫(yī)學學院;長春西諾生物科技有限公司;吉林農業(yè)大學動物科學技術學院;中國科學院微生物研究所;
【基金】：國家新藥創(chuàng)制重大專項(2015ZX09102025)
【分類號】：S852.4

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