【摘要】：為探究PB2基因D701N突變對(duì)犬流感病毒(canine influenza virus,CIV)H3N2的致病性影響,利用本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的CIV H3N2(A/canine/Guangdong/02/2011,C/GD/02)反向遺傳系統(tǒng)和定點(diǎn)突變技術(shù),獲得了2株拯救病毒(原毒株:r C/GD/02,突變株:r C/GD/02-701N)。聚合酶活性試驗(yàn)結(jié)果顯示,突變株的聚合酶活性顯著強(qiáng)于原毒株(P0.05),說(shuō)明PB2 D701N的突變能顯著增強(qiáng)CIV H3N2聚合酶活性;病毒生長(zhǎng)曲線顯示,突變株比原毒株在MDCK細(xì)胞中的生長(zhǎng)復(fù)制能力有所下降;小鼠致病性試驗(yàn)顯示,兩毒株均導(dǎo)致了小鼠的體重增長(zhǎng)速率輕微下降,但毒株間無(wú)顯著差異,且均未導(dǎo)致小鼠死亡。結(jié)果表明,PB2基因D701N的突變不會(huì)顯著影響CIV H3N2對(duì)小鼠的致病性。
[Abstract]:In order to investigate the pathogenicity of PB2 gene D701N mutation on canine influenza virus (canine influenza virus,CIV) H3N2, the reverse genetic system of CIV H3N2 (A / R / Guangdongr / 2011 / GD / 02) and site-directed mutation technique were used to obtain two strains of rescued virus (virulent strain: r C / GD / 02, mutant strain: r C/GD/02-701N). The results of polymerase activity test showed that the polymerase activity of the mutant was significantly higher than that of the virulent strain (P0.05), indicating that the mutation of PB2 D701N could significantly enhance the activity of CIV H3N2 polymerase, and the virus growth curve showed that, The pathogenicity test of mice showed that the growth rate of the two strains decreased slightly, but there was no significant difference between the two strains, and neither of them resulted in the death of mice. The results showed that the mutation of D701N in PB2 gene did not significantly affect the pathogenicity of CIV H3N2 in mice.
【作者單位】： 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院;廣東省獸醫(yī)臨床重大疾病綜合防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;廣東省寵物工程技術(shù)研究中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31372448,31672563) 國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2016YFD0501004) 公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201303042) 廣東省促進(jìn)科技服務(wù)業(yè)發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(2013B040200032) 廣東省獸醫(yī)臨床重大疾病綜合防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目(2013A061401013)
【分類號(hào)】：S852.65

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