【摘要】：利用雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)多克隆抗體構(gòu)建的免疫磁珠富集IBV,對Gen Bank中896株IBV S1基因序列及其多變區(qū)進(jìn)行分析,根據(jù)IBV強毒株和弱毒疫苗株序列差異設(shè)計引物,建立了一種基于免疫磁珠富集IBV后檢測S1基因多變區(qū)的多重RT-PCR方法。結(jié)果表明:該方法能擴增出強毒株約710 bp的通用片段和約350 bp的特異片段,弱毒疫苗株能擴增出約710 bp的通用片段和約210 bp的特異片段,能鑒別出強毒株和弱毒疫苗株。免疫磁珠富集IBV后比不富集病毒用RT-PCR方法檢測敏感性提高100倍。該方法為IBV檢測提供了新的技術(shù)支持。
[Abstract]:The sequence and variable region of IBV S1 gene of 896 strains of avian infectious bronchitis virus (Gen Bank) were analyzed by IBV, enriched with immunomagnetic beads constructed by polyclonal antibody against avian infectious bronchitis virus (IBV). Primers were designed according to the sequence difference between IBV virulent strain and attenuated vaccine strain. A multiplex RT-PCR method based on immunomagnetic bead enrichment (IBV) was developed to detect the variable region of S1 gene. The results showed that the common fragment of virulent strain about 710 bp and the specific fragment of 350 bp could be amplified by this method. The common fragment of about 710 bp and the specific fragment of about 210 bp could be amplified from attenuated vaccine strain, and the virulent strain and attenuated vaccine strain could be identified. The sensitivity of IBV enriched by immunomagnetic beads was 100 times higher than that of non-enriched virus by RT-PCR. This method provides new technical support for IBV detection.
【作者單位】： 四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院動物疫病防控與食品安全四川省重點實驗室 "985工程"西南資源環(huán)境與災(zāi)害防治科技創(chuàng)新平臺 生物資源與生態(tài)環(huán)境教育部重點實驗室;
【基金】：現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項資金(CARS-41-K09) 四川省科技支撐計劃項目(2014NZ0002) 國家自然科學(xué)基金項目(31372442)
【分類號】：S852.65

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本文編號：2225531