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H9N2亞型流感病毒血凝素受體結(jié)合區(qū)定點突變株拯救及其受體親和性鑒定

發(fā)布時間:2018-08-24 09:08
【摘要】:利用重疊PCR技術(shù)對H9N2亞型流感病毒Y280亞系毒株A/Chicken/Jilin/DH102/2012(H9N2)的血凝素受體結(jié)合區(qū)220-loop中相對保守的226位和227位進行了氨基酸置換,并通過反向遺傳技術(shù)拯救了定點突變病毒。固相酶聯(lián)試驗結(jié)果顯示:226位為L時,病毒偏嗜結(jié)合人型受體;226位為Q時,病毒偏嗜結(jié)合禽型受體;226位為M時,病毒同時具有與2種類型受體結(jié)合的能力,但偏嗜結(jié)合人型受體;227位為Q或M時,病毒均偏嗜結(jié)合人型受體。因此,相比于227位,Q226L突變足以改變病毒的受體偏嗜性。由于近年來90%以上的H9N2病毒分離株HA226位氨基酸都是L,推測226L是H9N2病毒感染哺乳動物的重要位點。
[Abstract]:Superposition PCR technique was used to replace 226 and 227 sites of hemagglutinin receptor binding region 220-loop of H9N2 subtype influenza virus Y280 strain A/Chicken/Jilin/DH102/2012 (H9N2), and reverse genetic technique was used to save the site-directed mutant virus. The results of solid-phase enzyme-linked assay showed that the virus had the ability to bind to two types of receptors at L, Q and M, respectively. But when the partial binding human receptor is Q or M, the virus is biased to the human receptor. Therefore, the Q226L mutation is sufficient to change the receptor bias of the virus. Since more than 90% of the HA226 amino acids of H9N2 virus isolates in recent years are L, 226L is supposed to be an important site of H9N2 virus infection in mammals.
【作者單位】: 吉林大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院;吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;吉林出入境檢驗檢疫局;
【基金】:國家自然科學(xué)青年基金資助項目(31101825) 吉林省教育廳“十二五”科學(xué)技術(shù)研究資助項目(吉教科合字[2015]第495號) 吉林大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費(科技平臺基地建設(shè)項目)(451160301169);吉林大學(xué)杰出青年科學(xué)基金培育計劃資助項目(450060501587) 吉林省科技廳重點科技攻關(guān)資助項目(20150204029NY)
【分類號】:S852.65

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本文編號:2200316

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