【摘要】：為建立快速檢測臨床1型鴨肝炎病毒(DHAV-1)感染的方法,根據(jù)DHAV-1的vp1基因序列設(shè)計(jì)1對引物,以DHAV-1及其他常見的感染鴨的病毒基因組為模板,建立了DHAV-1的特異性RT-PCR檢測方法;以10倍梯度稀釋的DHAV-1 RNA為模板,測定該方法的靈敏度;采集江蘇多地的疑似DHAV-1感染病料,提取基因組進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增,產(chǎn)物經(jīng)測序鑒定后判斷所建立方法的檢測率。結(jié)果顯示,建立的方法可以特異性擴(kuò)增DHAV-1 vp1基因保守區(qū)360 bp的序列,最低可檢測1 fg基因組模板,對臨床樣品檢測率為100%。表明,成功建立了特異性強(qiáng)、靈敏度高且可以用于臨床快速診斷DHAV-1感染的方法。
[Abstract]:In order to establish a method for rapid detection of clinical duck hepatitis virus (DHAV-1) infection, a pair of primers were designed according to the vp1 gene sequence of DHAV-1. The specific RT-PCR detection method for DHAV-1 was established using DHAV-1 and other common infected duck virus genomes as templates. The sensitivity of the method was determined by using 10 times gradient diluted DHAV-1 RNA as template, and the detection rate of the established method was determined by collecting suspected DHAV-1 infectious materials from many places in Jiangsu province and extracting genome for RT-PCR amplification. The results showed that the established method could specifically amplify the 360bp sequence of the conserved region of the DHAV-1 vp1 gene, and detect the 1fg genomic template at the lowest level, and the detection rate for clinical samples was 100. The results showed that the method was highly specific and sensitive and could be used for rapid clinical diagnosis of DHAV-1 infection.
【作者單位】： 江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院/江蘇省獸用生物制藥高技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：江蘇省高校自然科學(xué)研究面上項(xiàng)目(16KJB230004) 江蘇省“六大人才”高峰資助項(xiàng)目(NY-023,10410015002) 江蘇農(nóng)牧科技學(xué)院“鳳凰人才工程”項(xiàng)目 江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院重點(diǎn)支持項(xiàng)目(NSFZD1405,NSFPT201510NSFPT201512)
【分類號】：S852.65

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本文編號：2172969