【摘要】：為建立一種快速、靈敏、簡便的豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)早期檢測方法,本研究利用逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)恒溫擴增技術(shù)(RT-LAMP),針對PRRSV的ORF5基因片段設(shè)計了4條引物,利用Bst DNA聚合酶在65℃恒溫條件下進行逆轉(zhuǎn)錄擴增,通過1.0%瓊脂糖凝膠電泳和加入SYBR GreenⅠ染料肉眼判斷結(jié)果,建立了PRRSV RT-LAMP檢測方法。結(jié)果表明,該檢測方法具有良好的特異性,與其他常見病毒如豬瘟病毒、豬圓環(huán)病毒2型、豬細小病毒、豬偽狂犬病病毒等無交叉反應(yīng),較普通RT-PCR靈敏性高100倍。采用RT-LAMP和RT-PCR分別對10份臨床樣本同時進行檢測,符合率為100%。因此,本研究建立的RT-LAMP是一種可適用于臨床PRRSV檢測的快速、簡單、靈敏、特異的檢測方法。
[Abstract]:In order to establish a rapid, sensitive and simple method for early detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), four primers were designed for ORF5 gene fragment of PRRSV by reverse transcription-loop mediated isothermal amplification (RT-LAMP). The Bst DNA polymerase was amplified by reverse transcriptase at 65 鈩，

本文編號：2157608