【摘要】：為觀(guān)察致羔羊腦炎糞腸球菌XJ05株生物被膜(BF)的形成能力并檢測(cè)致羔羊腦炎糞腸球菌BF形成相關(guān)基因的攜帶情況,本研究以XJ05為研究對(duì)象,運(yùn)用96孔板建立不同時(shí)間BF模型,染色后酶標(biāo)儀測(cè)定D595nm值,并用倒置顯微鏡觀(guān)察BF形態(tài)。同時(shí)檢測(cè)11株菌中與BF形成相關(guān)基因(gelE、esp、ace、asa1、asa373、efaA、ef0591、ef3314、ahrc、eep)的攜帶情況,并對(duì)相關(guān)基因片段做同源性分析。結(jié)果顯示,在不同時(shí)間段XJ05株BF的生成量與空白對(duì)照組相比差異顯著(P0.05),24h時(shí)D595nm值最高且與其他各個(gè)時(shí)間段相比均差異顯著(P0.05)。顯微鏡下觀(guān)察6h時(shí)BF初具規(guī)模,可見(jiàn)散落的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),12~24h矩陣網(wǎng)格結(jié)構(gòu)明顯,24h時(shí)形成高度有序的網(wǎng)格結(jié)構(gòu),24h后網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)逐漸脫落,BF開(kāi)始降解。11株菌中10種相關(guān)基因的攜帶情況不同,有6株攜帶8種基因,1株攜帶7種基因,1株攜帶6種基因,1株攜帶2種基因,有2株未檢測(cè)到10種基因的任何一種。檢出的基因片段同源性均在93.3%~100.0%之間。結(jié)果表明,XJ05株能形成完整的BF,11株分離的致羔羊腦炎糞腸球菌中有9株攜帶部分與BF形成相關(guān)的基因。
[Abstract]:In order to observe the ability of formation of biofilm (BF) of Enterococcus faecalis strain XJ05 strain caused by encephalitis of lamb and to detect the carrying of genes related to BF formation of Enterococcus faecalis in lamb, a 96 hole plate was used to establish BF model in different time. After staining, the D595nm value was measured by enzyme labeling instrument, and the morphology of BF was observed by inverted microscope. At the same time, the carrying status of BF formation related gene (Egel Eespacea asa373efa373ef0591F3314ahrccep) in 11 strains of bacteria was detected, and the homology of the related gene fragments was analyzed. The results showed that the BF production of XJ05 strain was the highest at 24 h and significantly different from that of the control group (P0.05). When observed under microscope for 6 h, BF initially took shape. It can be seen that the scattered reticular structure can be seen at 24 hours after forming a highly ordered grid structure. After 24 hours, the reticular structure gradually desquamated and the BF began to degrade. 11 strains of bacteria began to carry 10 related genes differently. There were 6 strains with 8 genes and 1 strain with 7 genes and 1 strain with 6 genes and 1 strain with 2 genes. None of the 10 genes was detected in 2 strains. The homology of the detected gene fragments was between 93. 3% and 10. 0%. The results showed that 9 strains of Enterococcus faecalis isolated from 11 strains of BFN isolated from XJ05 strain could carry some genes related to BF formation.
【作者單位】： 石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31160507);國(guó)家自然科學(xué)基金(31260610)
【分類(lèi)號(hào)】：S858.26

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本文編號(hào)：2155404