本文選題：略陽烏雞 + 雞α-干擾素　； 參考：《動物醫(yī)學進展》2017年09期

【摘要】：通過構建雞α干擾素真核表達載體,以獲得能夠表達雞α干擾素的酵母工程菌株。首先根據(jù)GenBank公布的雞α干擾素基因序列設計上、下游引物,以略陽烏雞基因組DNA為模板,PCR擴增雞α干擾素基因片段。然后,利用基因重組技術將雞α-干擾素基因插入真核表達載體,通過菌落PCR和DNA測序確定目標載體,構建成功后轉化至釀酒酵母AH109,再通過營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)、質(zhì)粒提取和PCR鑒定帶JMB440-ChIFN-α載體的重組酵母菌株。最終通過酵母培養(yǎng)、總蛋白收集、SDS-PAGE電泳和Western blot等,確定雞α干擾素基因能夠與酵母菌株重組,并表達α干擾素,蛋白條帶大小約為23ku,與預期結果一致,表明成功構建了表達雞干擾素基因的工程酵母菌株。
[Abstract]:By constructing the eukaryotic expression vector of chicken interferon 偽, a yeast engineering strain capable of expressing chicken interferon 偽 was obtained. Firstly, according to the sequence of chicken interferon 偽 gene published by GenBank, the sequence of chicken interferon 偽 gene was amplified by PCR using the genomic DNA of Lueyang silky chicken as template. Then, chicken interferon 偽 gene was inserted into eukaryotic expression vector by gene recombination technique. The target vector was determined by colony PCR and DNA sequencing. The target vector was successfully constructed and transformed into Saccharomyces cerevisiae AH109. The recombinant yeast strain with JMB440-ChIFN- 偽 vector was identified by plasmid extraction and PCR. Finally, through yeast culture, SDS-PAGE electrophoresis and Western blot, the chicken interferon 偽 gene was recombined with yeast strain and expressed interferon 偽. The protein band size was about 23ku. the result was consistent with the expected results. The results showed that the engineering yeast strain expressing chicken interferon gene was successfully constructed.
【作者單位】： 陜西理工大學生物科學與工程學院;
【基金】：陜西省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新與攻關項目(2016NY-084)
【分類號】：Q78;S831

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 金茜;陳紫娟;徐旭東;;一種新型重組人復合α干擾素的表達、分離純化及活性測定[J];藥物生物技術;2011年01期

2 Lynne Keyes,徐梁;酵母溶解物中重組α干擾素的定量免疫印染法[J];細胞與分子免疫學雜志;1985年04期

3 張林元,鄧小昭,李淑德,刁勇,李越希,刁振寧,鐘江,東云仙,蘇德明;人α干擾素基因在家蠶細胞中的高表達[J];生物工程進展;1993年03期

4 王焱,周鳴南,王征宇,蔡菊娥,孫蘭英,劉新垣,B.L.Daugherty,S.Pestka;一種小鼠新α干擾素亞型基因的發(fā)現(xiàn)、序列測定與表達[J];中國科學C輯:生命科學;1997年03期

5 蔡家利;尹忠寶;朱廣倍;任燕斌;吳勝昔;黃國光;;重組豬α干擾素的體外活性測定和凍干保護劑的篩選[J];重慶理工大學學報(自然科學);2014年04期

6 李田田;楊靈;易詠竹;沈桂芳;張志芳;李軼女;;雞α干擾素在家蠶中的表達及抗病毒活性測定[J];生物技術通報;2014年03期

7 張永紅;;魯西黃牛α干擾素基因分析[J];甘肅科技;2009年11期

8 鄭玲莉,楊嗣坤,徐志工,周正芳;人外傷脾細胞誘生γ干擾素后再次誘生α干擾素的效果[J];第二軍醫(yī)大學學報;1990年06期

9 焦道忠;王云龍;李晨陽;李春利;;雞α干擾素基因的克隆與表達[J];生物學雜志;2008年05期

10 梁希若;鄭志堅;馬志賢;羅瑞仙;;用扁桃體細胞制備臨床級α干擾素(IFN—α)[J];廣州醫(yī)學院學報;1982年03期

相關會議論文 前2條

1 楊逢勇;虞浩;劉磊;蔣春雷;王云霞;;α干擾素對HPA軸的調(diào)節(jié)作用及其受體機制[A];中國生理學會、中國神經(jīng)科學會2005年神經(jīng)內(nèi)分泌免疫學術研討會論文摘要匯編[C];2005年

2 王云霞;蔣春雷;;阿片受體介導α干擾素致熱作用[A];中國生理學會肥胖的臨床與基礎暨神經(jīng)免疫內(nèi)分泌學術研討會論文摘要匯編[C];2003年

相關博士學位論文 前1條

1 都特;一、乙型肝炎病毒感染結局的遺傳易感性研究 二、α干擾素治療慢性乙型肝炎的藥物基因組學研究 三、發(fā)作性運動源性舞蹈徐動癥致病基因的初步定位和突變篩查[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2007年

相關碩士學位論文 前4條

1 蔣佳穎;重組豬α干擾素的分離純化與安全性研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學;2015年

2 付玉和;犬α干擾素畢赤酵母表達條件的優(yōu)化、純化及其活性研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2016年

3 劉占通;豬α干擾素基因克隆、原核表達及抗病毒活性研究[D];河南農(nóng)業(yè)大學;2005年

4 崔敏;豬α干擾素基因在畢赤酵母中的表達與活性檢測[D];福建農(nóng)林大學;2008年

，

本文編號：2116526