發(fā)布時(shí)間：2018-07-05 14:57

  本文選題：毒害艾美耳球蟲 + Engam基因　； 參考：《中國獸醫(yī)科學(xué)》2017年12期

【摘要】：提取毒害艾美耳球蟲配子體總RNA,應(yīng)用RT-PCR擴(kuò)增得到Engam59基因,對(duì)其克隆測序并進(jìn)行序列分析。結(jié)果表明,Engam59基因全長為1 473 bp,為一個(gè)完整的開放閱讀框,編碼490個(gè)氨基酸,具有1個(gè)酪氨酸-絲氨酸富集區(qū)和1個(gè)脯氨酸-甘氨酸富集區(qū),與柔嫩艾美耳球蟲Etgam59基因的同源性為93.4%。選擇該基因編碼的第211~432位氨基酸間的肽段進(jìn)行截短表達(dá),獲得的重組蛋白大小在27.69 ku左右,主要以包涵體的形式存在。Western-blot分析結(jié)果顯示,該重組蛋白能被小鼠抗重組蛋白多克隆抗體和毒害艾美耳球蟲病雞康復(fù)血清識(shí)別,表明該重組蛋白具有很好的免疫原性。本研究結(jié)果為進(jìn)一步探析毒害艾美耳球蟲配子體蛋白的功能與研制雞球蟲病基因工程疫苗奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:The total RNAs of gametophyte of Eimeria virulens were extracted. Engam59 gene was amplified by RT-PCR, cloned and sequenced. The results showed that the full length of Engam59 gene was 1 473 BP, which was a complete open reading frame, encoding 490 amino acids, with a tyrosine serine rich region and a proline glycine rich region. The homology between Etgam59 gene and Etgam59 gene of Eimeria tenella is 93. 4%. The peptide fragment of the 21142nd amino acid position encoded by the gene was truncated and expressed. The size of the recombinant protein was about 27.69 ku, which was mainly in the form of inclusion body. The results of Western-blot analysis showed that the recombinant protein could be expressed in the form of inclusion body. The recombinant protein could be recognized by the polyclonal antibody of mouse anti-recombinant protein and the recovered serum of the poisoned Eimeria coccidiosis chicken, which indicated that the recombinant protein had good immunogenicity. The results laid a foundation for further study on the function of gametophyte protein and the development of genetic engineering vaccine for coccidiosis.
【作者單位】： 揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院江蘇省高校動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2017YFD0501205) 國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31472181,31602039) 江蘇省高校自然科學(xué)研究面上項(xiàng)目(15KJB230005) 江蘇省博士后科研資助計(jì)劃項(xiàng)目(1601054C) 江蘇省高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程項(xiàng)目
【分類號(hào)】：S852.723

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本文編號(hào)：2100603