本文選題：miR-a + 酪氨酸相關(guān)蛋白　； 參考：《中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào)》2017年01期

【摘要】：miRNA是在許多生物過程中都起著至關(guān)重要作用的一類內(nèi)源性非編碼的小RNA,與癌癥、腫瘤的發(fā)生有關(guān)�，F(xiàn)發(fā)現(xiàn)很多miRNA在黑色素生成中都有重要的調(diào)控作用,但miR-146a是否對黑色素的生成具有影響未見報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)miR-146a通過靶向抑制酪氨酸酶相關(guān)蛋白1(tyrosinase related protein 1,TYRP1)的表達(dá)而使黑色素生成降低。在小鼠黑色素細(xì)胞中分別轉(zhuǎn)染miR-146a mimic和miR-146a抑制劑,通過qRT-PCR與Western印跡分析比較各實(shí)驗(yàn)組中TYRP1基因與酪氨酸家族相關(guān)基因酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)、酪氨酸酶相關(guān)蛋白2(tyrosinase related protein 2,TYRP2)的表達(dá)差異。雙熒光報(bào)告實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證TYRP1與miR-146a的靶向關(guān)系,雙熒光酶活性結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組相比對照組,熒光素酶活性明顯降低,說明TYRP1是miR-146a的靶基因之一;qRT-PCR和Western印跡結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組TYR、TYRP1及TYRP2在mRNA水平和蛋白質(zhì)水平表達(dá)均顯著降低;紫外分光光度法檢測黑色素含量,結(jié)果顯示miR-146a mimic轉(zhuǎn)染組黑色素含量明顯下降,而抑制組的黑色素含量呈上升趨勢。綜上所述,miR-146a通過靶向抑制TYRP1基因的表達(dá),而影響TYR家族成員的表達(dá),調(diào)控黑色素的生物合成。
[Abstract]:MiRNA is a class of endogenous non-coding small RNAs that play an important role in many biological processes and are related to cancer and tumorigenesis. It has been found that many miRNAs play an important role in melanogenesis, but whether miR-146a has an effect on melanin production has not been reported. In this study, we found that miR-146a could inhibit the expression of tyrosinase associated protein 1 (tyrosinase related protein 1 (TYRP1) and reduce melanin production. MiR-146a mimic and miR-146a inhibitors were transfected into mouse melanocytes, respectively. The expression of tyrosinase 1 and tyrosinase family tyrosinase (tyrosinase) and tyrosinase associated protein 2 (tyrosinase related protein 2 (TYRP2) were analyzed by qRT-PCR and Western blot. The double fluorescence report experiment verified the targeting relationship between TYRP1 and miR-146a. The results of double fluorescence enzyme activity showed that the luciferase activity in the experimental group was significantly lower than that in the control group. These results indicated that TYRP1 was one of the target genes of miR-146a and the results of Western blot and RT-PCR showed that the expression of TYRP1 and TYRP2 in the experimental group was significantly decreased at both mRNA and protein levels, and the content of melanin was detected by ultraviolet spectrophotometry. The results showed that the melanin content in miR-146a mimic transfection group was significantly decreased, while the melanin content in inhibitory group was on the rise. In conclusion, miR-146a inhibits the expression of TYRP1 gene and regulates the biosynthesis of melanin by targeting the expression of TYR family members.
【作者單位】： 山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院;山西農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)計(jì)劃項(xiàng)目(No.CXTD201201) 山西省科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(No.2014031102-3)資助~~
【分類號】：S852.2

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本文編號：2092543