本文選題：小反芻獸疫病毒 + N蛋白　； 參考：《畜牧與獸醫(yī)》2017年12期

【摘要】：將編碼小反芻獸疫病毒(PPRV)N蛋白的基因全長克隆到pBacPAK9載體中,并在昆蟲細(xì)胞中進行表達。對表達產(chǎn)物進行SDS-PAGE分析,并用PPRV陽性血清進行了Western blot鑒定。用Ni-IDA親和柱對組氨酸融合表達的N蛋白進行了純化,并對純化產(chǎn)物進行了理化性質(zhì)和抗原活性分析。最后以表達的N蛋白作為包被抗原,建立間接ELISA檢測方法,臨床檢測137份山羊血清并與IDvet公司的商品化PPRV抗體檢測試劑盒進行比較。結(jié)果表明,制備的PPRV N蛋白抗原在溶液中以單體形式存在,具有非常好的抗原活性。用該蛋白建立的間接ELISA檢測方法與IDvet試劑盒符合率為956%。本研究為小反芻獸疫病毒重組N蛋白抗原制備相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立奠定了基礎(chǔ),同時建立的ELISA抗體檢測方法可以很好地用于小反芻獸疫的臨床診斷。
[Abstract]:The gene encoding the N protein of small ruminant virus (PPRV) was cloned into pBacPAK9 vector and expressed in insect cells. The expressed product was analyzed by SDS-PAGE and identified by Western blot with PPRV-positive serum. The N protein expressed by histidine fusion was purified by Ni-IDA affinity column, and the physicochemical properties and antigen activity of the purified product were analyzed. In the end, the expressed N protein was used as the coated antigen, and an indirect Elisa method was established. 137 goat serum samples were detected and compared with the commercial PPRV antibody detection kit of IDvet Company. The results showed that the prepared PPRV N protein antigen existed in the form of monomer in the solution and had very good antigenic activity. The coincidence rate between the indirect Elisa method and IDvet kit was 956. This study laid a foundation for the establishment of quality standard for the preparation of recombinant N protein antigen of small ruminant disease virus, and the Elisa antibody detection method can be used in the clinical diagnosis of small ruminant disease.
【作者單位】： 北京世紀(jì)元亨動物防疫技術(shù)有限公司;中國動物疫病預(yù)防控制中心;
【基金】：公益性行業(yè)科研專項經(jīng)費(201510017-03)
【分類號】：S852.65

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本文編號：2091121