本文選題：多重PCR + 非洲豬瘟病毒　； 參考：《中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年02期

【摘要】：為建立同時(shí)檢測(cè)非洲豬瘟病毒(ASFV)、水皰性口炎病毒(VSV)、豬口蹄疫病毒(FMDV),豬瘟病毒(CSFV)以及豬偽狂犬病病毒(PRV)的多重RT-PCR檢測(cè)方法,本研究根據(jù)Gen Bank中登錄的參考病毒株序列,選擇各病毒的保守序列設(shè)計(jì)5對(duì)特異性引物,通過(guò)優(yōu)化反應(yīng)條件,建立了一種可以同時(shí)快速檢測(cè)以上5種病毒的多重RT-PCR檢測(cè)方法。結(jié)果顯示,該方法對(duì)不同的細(xì)菌或病毒模板擴(kuò)增結(jié)果均為陰性,特異性強(qiáng);敏感性試驗(yàn)表明該方法對(duì)PRV、CSFV、ASFV、VSV和FMDV的核酸最少檢出量分別為8.82×10~3拷貝/μL、6.87×10~4拷貝/μL、5.71拷貝/μL、4.93×10~4拷貝/μL和4.32×10~2拷貝/μL。以上結(jié)果表明該方法快速、靈敏、特異性強(qiáng),對(duì)以上5種豬病病毒能夠進(jìn)行快速鑒別檢測(cè),為其臨床診斷與流行病學(xué)調(diào)查提供了有效的檢測(cè)方法。
[Abstract]:In order to establish a multiplex RT-PCR method for simultaneous detection of African classical swine fever virus (ASFV), vesicular stomatitis virus (VSV), foot-and-mouth disease virus (FMDV), classical swine fever virus (CSFV) and porcine pseudorabies virus (PRV), a multiplex RT-PCR method was developed for the detection of African swine fever virus (ASFV), vesicular stomatitis virus (VSV), swine foot and mouth disease virus (FMDV), swine fever virus (CSFV) and porcine pseudorabies virus (PRV). Five pairs of specific primers were designed according to the conserved sequence of each virus. By optimizing the reaction conditions, a multiplex RT-PCR method was developed for the simultaneous and rapid detection of the above five viruses. The results showed that the PCR assay was negative and specific for different bacterial or viral templates, and the sensitivity test showed that the minimum detectable amounts of nucleic acid for PRVG CSFV VSV and FMDV were 8.82 脳 10 ~ (-3) copies / 渭 L ~ 6.87 脳 10 ~ (4) copies / 渭 L 5.71 copies / 渭 L 4.93 脳 10 ~ (4) copies / 渭 L and 4.32 脳 10 ~ (2) copies / 渭 L, respectively. The results showed that the method was rapid, sensitive and specific, and could be used for rapid identification and detection of the above five kinds of swine disease viruses, which provided an effective method for clinical diagnosis and epidemiological investigation.
【作者單位】： 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;動(dòng)物疫病與人類健康四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2013BAD12B04)
【分類號(hào)】：S852.651

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本文編號(hào)：2070575