本文選題：傳染性法氏囊病病毒 + 衣殼蛋白　； 參考：《中國畜牧獸醫(yī)》2017年07期

【摘要】：為獲得高質(zhì)量的病毒衣殼蛋白VP2,本研究克隆了傳染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)超強毒株Gx的VP2基因,并亞克隆至載體pCold-Ⅰ,進而獲得重組原核表達質(zhì)粒pCold-Ⅰ-GxVP2,在Transetta(DE3)工程菌中優(yōu)化條件進行IBDV衣殼蛋白VP2的可溶性表達,運用Ni-NTA親和層析和凝膠過濾兩種技術串聯(lián)的方法進行蛋白純化,運用單克隆抗體介導的Western blotting技術鑒定純化蛋白的特異性,免疫SPF雞鑒定純化蛋白的免疫活性。結(jié)果顯示,在冷休克條件下,IBDV衣殼蛋白VP2在Transetta(DE3)工程菌中實現(xiàn)了可溶性表達;通過純化獲得了高純度的VP2,濃度為542μg/mL;該蛋白不僅能與VP2單克隆抗體特異性反應,還能刺激雞產(chǎn)生特異性免疫應答,具有良好的免疫活性。本研究在IPTG為1mmol/L,15℃、120r/min,誘導時間為24h的條件下,實現(xiàn)了有免疫活性的IBDV衣殼蛋白VP2的可溶性表達和純化。高純度、可溶、具有功能活性的衣殼蛋白的制備,為深入開展IBDV致病機制研究奠定了基礎。
[Abstract]:In order to obtain high quality capsid protein VP2, the VP2 gene of infectious bursal disease virus (infectious bursal disease virusIBDV) strain GX was cloned and subcloned into vector pCold- 鈪，

本文編號：2069676