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口蹄疫病毒結(jié)構(gòu)蛋白VP1與細(xì)胞間黏附分子ICAM-2重組融合蛋白的表達(dá)及免疫原性分析

發(fā)布時(shí)間:2018-06-25 20:31

  本文選題:口蹄疫病毒 + 融合蛋白; 參考:《中國獸醫(yī)科學(xué)》2017年08期


【摘要】:利用PAS(PCR-based accurate synthesis)方法人工合成融合蛋白基因序列VP1-ICAM-2,通過限制性內(nèi)切酶Bam HⅠ和HindⅢ將合成的基因序列引入轉(zhuǎn)移載體p Fast-Bac1,從而獲得重組質(zhì)粒pFastBac1-VP1-ICAM-2。然后將其轉(zhuǎn)化至DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞后進(jìn)行藍(lán)白斑篩選,獲得陽性重組桿粒rBacmidVP1-ICAM-2。將陽性重組桿粒轉(zhuǎn)染Sf9細(xì)胞獲得重組桿狀病毒rBac-VP1-ICAM-2。Western-blot檢測(cè)結(jié)果顯示,重組蛋白約57 ku,與預(yù)期結(jié)果相符且能被FMDV A型陽性血清所識(shí)別。將親和層析純化的融合蛋白接種豚鼠,對(duì)其在豚鼠中的免疫原性進(jìn)行分析;結(jié)果,融合蛋白VP1-ICAM-2能誘導(dǎo)豚鼠產(chǎn)生特異性抗口蹄疫病毒的體液免疫應(yīng)答和細(xì)胞免疫應(yīng)答。上述研究結(jié)果為研制新型口蹄疫亞單位疫苗提供了思路。
[Abstract]:The recombinant plasmid pFastBac1-VP1-ICAM-2 was synthesized by pas (PCR-based accurate synthesis) method. The recombinant plasmid pFastBac1-VP1-ICAM-2 was obtained by introducing the synthesized gene sequence into the transfer vector pFast-Bac1 by restriction endonuclease Bam H 鈪,

本文編號(hào):2067382

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