發(fā)布時(shí)間：2018-06-24 23:19

  本文選題：犢牛腹瀉 + 產(chǎn)腸毒素大腸桿菌��； 參考：《石河子大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)是一種可引起人畜腹瀉的致病性細(xì)菌,尤其對(duì)初生犢牛、羔羊、仔豬等幼畜具有較大危害。2015年3~6月,新疆石河子、沙灣、阿克蘇、博樂四個(gè)地區(qū)的6個(gè)規(guī)�；�(chǎng)先后發(fā)生初生犢牛腹瀉,發(fā)病率達(dá)40%~60%,死亡率達(dá)50%~70%,導(dǎo)致犢牛死亡千余頭,造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,為查明這些牛場(chǎng)犢牛腹瀉是否與大腸桿菌有關(guān),在流行病學(xué)、臨床檢查以及剖解的基礎(chǔ)上,無(wú)菌采取6個(gè)規(guī)�；�(chǎng)因腹瀉死亡犢牛的腸系膜淋巴結(jié)等病料分別進(jìn)行了細(xì)菌的分離鑒定、血清型鑒定、腸毒素基因及菌毛基因的PCR檢測(cè)、溶血性測(cè)定、小鼠致病性試驗(yàn)、藥物敏感性測(cè)定。研究結(jié)果如下:(1)采集了新疆南北疆4個(gè)地區(qū)的6個(gè)規(guī)�；�(chǎng)因腹瀉死亡犢牛的腸系膜淋巴結(jié)、肝臟及腸內(nèi)容物等病料60份,分離獲得53株培養(yǎng)特性、染色特性及生化鑒定均符合大腸埃希菌的菌株,綿羊血平板上均為β溶血,表明溶血性大腸桿菌是引起犢牛腹瀉死亡的主要病原之一。(2)采用O抗原凝集試驗(yàn)對(duì)新疆南北疆4個(gè)地區(qū)6個(gè)規(guī)�；�(chǎng)的29株代表株進(jìn)行O血清型鑒定,其中10株被定型,共覆蓋8種血清型,分別是O101、O7、O11、O20、O30、O44、O1、O76,且存在明顯的地區(qū)性差異。(3)采用黏附素和腸毒素基因多重PCR檢測(cè)的方法從53株分離株中檢出49株同時(shí)含有黏附素基因K99、F41和腸毒素基因STa的菌株,陽(yáng)性率為92.5%,表明多數(shù)分離株攜帶K99、F41和Sta毒力因子,為產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌。(4)藥敏結(jié)果顯示:53株分離株對(duì)抗生素的敏感程度不同,且存在區(qū)域差異,多數(shù)分離株對(duì)阿莫西林、氨芐西林、阿莫西林/克拉維酸、頭孢拉啶、頭孢噻吩、慶大霉素、環(huán)丙沙星等耐藥;對(duì)阿米卡星、頭孢西丁現(xiàn)較高敏感性。(5)10株不同地區(qū)來(lái)源代表株的純培養(yǎng)物經(jīng)腹腔注射小鼠后,感染小鼠均在12~36h死亡,其中9株可致小鼠在12h內(nèi)死亡,而10只生理鹽水對(duì)照組小鼠健活。無(wú)菌采取死亡小鼠肝臟,進(jìn)行細(xì)菌分離鑒定,獲得形態(tài)、生化鑒定均符合大腸桿菌的菌株,表明分離株具有較強(qiáng)的致病性。綜上研究結(jié)果表明:攜帶K99、F41菌毛及Sta的產(chǎn)腸毒性大腸桿菌是引起這6個(gè)牛場(chǎng)初生犢牛腹瀉并造成死亡的主要病原之一,同時(shí)也初步揭示了該地區(qū)牛源大腸桿菌的耐藥情況及毒力基因的流行情況,可為該地區(qū)犢牛大腸桿菌性腹瀉的藥物和免疫防治提供科學(xué)參考。
[Abstract]:Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) is a pathogenic bacterium that can cause diarrhea in human and animal, especially to newborn calves, lambs, piglets and other young animals. In six large-scale cattle farms in four districts of Bole, diarrhea occurred successively in newborn calves, with an incidence of 400.60 and a mortality of 500.700.This resulted in the death of more than 1,000 calves, resulting in serious economic losses. In order to find out whether diarrhea in these calves is related to E. coli, On the basis of epidemiology, clinical examination and dissection, bacterial isolation and serotype identification were carried out in 6 large scale calf calves died of diarrhea, such as mesenteric lymph nodes. The detection of enterotoxin gene and fimbriae gene by PCR, hemolytic test, pathogenicity test in mice and drug sensitivity test. The results were as follows: (1) 60 samples of mesenteric lymph nodes, liver and intestinal contents were collected from 6 large scale cattle farms in four areas of Xinjiang, Xinjiang. The staining characteristics and biochemical identification were consistent with Escherichia coli strains, and 尾 -hemolysis was found on sheep blood plate. The results showed that hemolytic Escherichia coli was one of the main pathogens leading to the death of calf diarrhea. (2) using O antigen agglutination test, 29 representative strains of 6 large-scale cattle farms in 4 regions of Xinjiang were identified with O serotype, of which 10 strains were identified. A total of 8 serotypes, O101, O7, O11, O20, O30, O4, O1, O76, were isolated, and there were significant regional differences. (3) A total of 49 strains containing adhesion gene K99F41 and enterotoxin gene STa were detected from 53 isolates by multi-weight PCR. The positive rate was 92.5, indicating that most of the isolates carried K99F41 and Sta virulence factors, which were enterotoxigenic Escherichia coli. (4) the drug sensitivity results showed that the sensitivity of 53 strains to antibiotics was different, and there were regional differences, and most of the isolates were sensitive to amoxicillin. Ampicillin, amoxicillin / clavulanic acid, cefradine, cefthiophene, gentamicin, ciprofloxacin, etc. Cefoxitin was highly sensitive. (5) 10 strains of pure cultures from different regions were injected intraperitoneally into mice, the infected mice died within 12 ~ 36 hours, 9 of them could cause mice to die within 12 hours, while 10 normal saline control mice were healthy. The bacteria were isolated and identified in the liver of dead mice. The morphology and biochemical identification of the bacteria were in accordance with the strains of Escherichia coli, which indicated that the isolates had strong pathogenicity. The results showed that enterotoxigenic Escherichia coli carrying K99F41 fimbriae and Sta was one of the main pathogens causing diarrhea and death in the six calves. At the same time, the drug resistance and virulence gene prevalence of bovine Escherichia coli in this area were preliminarily revealed, which could provide a scientific reference for drug and immune prevention and control of Escherichia coli diarrhea in calves in this area.
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S858.23

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本文編號(hào)：2063433