本文選題：脂聯素 + 肉仔雞��； 參考：《山東農業(yè)大學》2015年碩士論文

【摘要】：本論文主要是進行的脂聯素對家禽中骨骼肌脂肪代謝的調控機制的研究。本試驗從“脂肪酸氧化影響脂肪沉積”的方向入手,研究脂聯素調控肉雞骨骼肌脂肪沉積中的作用。本試驗建立肉雞骨骼肌脂肪異位沉積的活體模型(不同生長階段、不同脂肪沉積能力的個體、DEX處理)采用Real-time PCR和Western blotting等方法,研究脂聯素的蛋白水平和脂肪氧化情況,來證明脂聯素是否調控肉雞骨骼肌脂肪氧化或沉積。本課題從核酸、蛋白、細胞和組織水平揭示脂肪代謝的調控機理,完善對脂聯素影響機體能量分配的認識,為指導家禽生產和改善肉品質提供理論依據。試驗一:肉仔雞脂聯素的時空表達規(guī)律選取體重相近的1日齡Arbor Acres雄性肉仔雞112只,自由采食飲水,分別在7日齡、14日齡、21日齡、28日齡、35日齡、42日齡、49日齡時,隨機選取8只雞,翅靜脈采血,分離血漿并置于4oC保存。斷頸放血處死,分離肝臟、腹脂(腹部加肌胃及腸系膜周圍脂肪)、胸肌、腿肌并稱重。取腹脂、胸大肌和臀股二頭肌。結果顯示,隨著日齡的增加,胸肌、腿肌和腹部脂肪的比重呈增加趨勢,而血液中的脂聯素含量和肝臟比重呈下降趨勢。胸肌和腿肌以及腹部脂肪中的脂聯素和受體mRNA表達量呈下降趨勢。這說明,隨著周齡的增加,肉仔雞的脂肪沉積能力在加強,同時脂聯素在脂肪組織的分泌功能、在骨骼肌組織中的作用降低。說明脂聯素有可能參與了對肉仔雞骨骼肌脂肪沉積的調控。試驗二:脂聯素與肉仔雞脂肪沉積能力的關系選取42日齡Arbor Acres雄性肉仔雞45只,編號,翅靜脈采血,分離血漿并測定血漿中TG的含量和VLDL的含量。根據TG和VLDL的含量分為根據TG和VLDL的含量進行分組,即高TG和高VLDL組(Fat)和對照組,自由采食和飲水。49日齡時,隨機選取8只雞,翅靜脈采血,分離血漿并置于4oC保存。斷頸放血處死,分離腹脂并稱重、取腹脂、胸大肌和臀股二頭肌。結果發(fā)現,高脂肪組肉雞的胸肌脂聯素及其受體1的mRNA表達水平低于對照雞組,而高脂肪組的腹脂比重顯著高于對照組,并且血液中脂聯素的含量高脂肪組低于對照組。結果提示脂聯素在骨骼肌中的脂肪氧化能力下降,從而導致肉雞身體脂肪含量的增加,具體表現在腹部和胸肌。試驗三:脂聯素與不同品系家禽脂肪沉積能力的關系我們選擇7周齡的蛋雞和肉雞各10只采集樣品,結果顯示,肉雞的腹脂比重顯著比蛋雞的大,而腹脂中脂聯素受體的mRNA水平顯著降低,同時血液中脂聯素含量也顯著低于蛋雞。以上結果提示脂聯素在骨骼肌中的脂肪氧化能力下降,從而導致肉雞身體脂肪含量的增加,具體表現在腹部和胸肌。試驗四:地塞米松與不同能量狀態(tài)下肉仔雞脂肪代謝的關系選取60只體重相近的28日齡Arbor Acres雄性肉仔雞,隨機分成2個日糧處理,每個處理30個重復,每個重復1只雞:高能日糧;低能日糧。35d時每個日糧處理分別下設2個處理,處理7天,每個重復1只雞:DEX:注射地塞米松磷酸鈉,劑量為2.0mg/kg體重;Control:注射同劑量的生理鹽水。自由采食和飲水。42日齡時采集樣品。翅靜脈采血,分離血漿并置于4oC保存。斷頸放血處死,分離肝臟、腹脂、胸肌、腿肌并稱重。取腹脂、胸大肌和臀股二頭肌。同時,選取22日齡的肉雞,分成兩組,分別飼喂高能日糧和低能日糧,42日齡時采樣。結果顯示,7天的高低能日糧對肉雞腹脂、胸腿肌重脂聯素及其受體的表達沒有顯著影響,而長期的高低能日糧對肉雞腹脂、胸腿肌重脂聯素及其受體的表達有顯著影響,這說明脂聯素可能參與了體內能量的調節(jié)。DEX處理后,顯著增加了腹脂和肝臟的比重,顯著降低了腹脂脂聯素mRNA水平,顯著降低了血液脂聯素含量,這些結果提示DEX處理后肉仔雞脂聯素的分泌功能降低。DEX導致肉仔雞胸肌脂聯素和受體2的mRNA水平提高。這個結果可能是對血液循環(huán)中低脂聯素的一個負反饋反應。肉仔雞骨骼肌的脂肪沉積能力由于DEX的處理而顯著增強,說明DEX顯著降低了骨骼肌的脂肪酸氧化能力,進而導致脂肪異位沉積的增加。DEX導致肉仔雞胸肌和腿肌的AMPK磷酸化水平均顯著降低,這進一步說明了骨骼肌的脂肪酸氧化能力顯著下降,并且提示脂聯素對骨骼肌脂肪代謝的調控可能是通過AMPK-CPT1途徑。試驗五:脂聯素調控雞成肌細胞脂肪代謝的機制研究分別用DEX和脂聯素處理成肌細胞,結果顯示用DEX處理后,細胞內脂肪的含量是增加的,并且脂聯素的表達量是下降的,AMPK在mRNA水平無顯著性差異,CPT1的活性有減少的趨勢。當用脂聯素處理細胞后,細胞內的甘油三酯的含量是降低的,AMPK的磷酸化水平是增加的,同時添加脂聯素也會使成肌細胞CPT1的活性增加。這說明脂聯素調節(jié)成肌細胞內脂肪代謝的原因可能是:脂聯素調控AMPK,從而增加了脂肪酸的氧化,進而減少細胞內脂肪的積累。可能通路為ADPN-AMPK-CPT1。
[Abstract]:The effects of adiponectin on fat metabolism in skeletal muscle of broiler were studied by means of real - time PCR and Western blotting . The results suggested that the levels of adiponectin and its receptor 1 mRNA in muscle were significantly lower than those in control group , and the content of adiponectin in abdominal fat group was significantly lower than that of control group . The expression of adiponectin in muscle cells of broilers was decreased . The results suggested that DEX treatment could decrease the fatty acid oxidation ability of muscle cells and increase the activity of adiponectin . The results suggested that DEX treatment could decrease the level of fat metabolism in muscle cells .
【學位授予單位】：山東農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S831.5

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