本文選題：苦馬豆素 + 單克隆抗體�。� 參考：《中國畜牧獸醫(yī)》2017年07期

【摘要】：本試驗(yàn)采用苦馬豆素(swainsonine,SW)人工抗原SW-OVA免疫接種BALB/c小鼠,通過雜交瘤技術(shù)建立了1株能穩(wěn)定分泌SW單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞1F10,雜交瘤細(xì)胞染色體數(shù)目為45~50對。經(jīng)間接ELISA檢測,該株細(xì)胞培養(yǎng)上清中抗體效價為1∶25 600,誘生腹水效價為1∶80 000。單克隆抗體的亞型為IgG1,親和力解離常數(shù)為1.14×1010,腹水抗體純化后純度可達(dá)98%,回收率80%,SDS-PAGE凝膠電泳可見單克隆抗體的輕鏈、重鏈分子質(zhì)量分別為25和50ku,Western blotting檢測抗體能特異性的識別SW。其線性檢測范圍為4~128μg/mL(R2=0.9969),與BSA、明膠、多聚賴氨酸、α-甘露糖苷等無交叉反應(yīng)。本試驗(yàn)制備的SW單克隆抗體為免疫學(xué)檢測SW和免疫學(xué)防制家畜瘋草中毒奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:In this experiment, BALB / c mice were immunized with swainsonine SW artificial antigen SW-OVA. A hybridoma cell line 1F10 was established by hybridoma technique. The chromosome number of hybridoma cells was 4550 pairs. The antibody titer of the supernatant was 1:25 600 and the induced ascites titer was 1:80 000 by indirect Elisa. The subtype of monoclonal antibody was IgG1, the affinity dissociation constant was 1.14 脳 10 ~ (10), and the purity of purified ascites antibody could reach 98. The recovery rate of 80% SDS-PAGE gel electrophoresis showed the light chain of monoclonal antibody, and the molecular weight of heavy chain was 25 and 50ku-Western blotting, respectively. The linear detection range was 4 ~ 128 渭 g / mL (R ~ (2 +) 0.9969), and there was no cross reaction with BSA, gelatin, poly-lysine, 偽 -mannoside and so on. The SWmonoclonal antibody prepared in this study lays a foundation for immunological detection of SW and immunological control of poisoning of wild grass in domestic animals.
【作者單位】： 塔里木大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)塔里木畜牧科技重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31460678) 國家星火計劃項(xiàng)目(2015GA891015) 兵團(tuán)塔里木畜牧科技重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放課題(HS201207)
【分類號】：S856.9

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2053307