本文選題：HK三甲基化 + HK三甲基化　； 參考：《西南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)》2017年05期

【摘要】：該研究主要運用單細胞免疫熒光技術(shù)分析豬卵母細胞和克隆胚胎發(fā)育過程中,H3K4和H3K9三甲基化(H3K4me3,H3K9me3)的表達情況.收集體外成熟0h,6h,12h,24h,30h,36h,42h的豬卵母細胞;同時通過體細胞核移植操作獲得一細胞、四細胞、桑葚胚和囊胚期克隆胚胎,經(jīng)過免疫熒光染色,在激光共聚焦顯微鏡下觀察H3K4me3和H3K9me3修飾在卵母細胞和胚胎中的變化情況.免疫熒光結(jié)果顯示,在不同減數(shù)分裂階段的豬卵母細胞內(nèi)均能觀察到H3K4me3的表達,并且呈現(xiàn)出逐漸下降的趨勢;在生發(fā)泡期(GV),生發(fā)泡晚期(L-GV)和生發(fā)泡破裂(GVBD)階段的卵母細胞中能發(fā)現(xiàn)明顯的H3K9me3表達,隨著減數(shù)分裂的進行,H3K9me3表達消失,在第一次減數(shù)分裂中期前階段(Pre-MI)到第二次減數(shù)分裂中期(MⅡ)階段卵母細胞中未發(fā)現(xiàn)H3K9me3熒光信號.H3K4me3和H3K9me3在不同發(fā)育階段的豬克隆胚胎中都有表達,其中H3K4me3在不同階段胚胎中熒光信號強度相近,H3K9me3在四細胞胚胎中熒光強度降低,在桑葚胚和囊胚中熒光強度出現(xiàn)升高的趨勢.以上結(jié)果說明,H3K4me3參與調(diào)控豬卵母細胞體外成熟的整個過程,H3K4me3和H3K9me3在豬體細胞核移植胚胎早期發(fā)育過程中可能具有調(diào)控作用.
[Abstract]:In this study, the expression of H3K4 and H3K9 trimethylated H3K4 and H3K9 in porcine oocytes and cloned embryos were analyzed by single cell immunofluorescence technique. Porcine oocytes were collected from mature porcine oocytes in vitro from 0 h to 6 h ~ (12) h ~ (24) h ~ (30) h ~ (36) h ~ (-1) and 1 cell, 4 cell, morula and blastocyst stage cloned embryos were obtained by somatic cell nuclear transfer, and were stained by immunofluorescence. The changes of H3K4me3 and H3K9me3 modification in oocytes and embryos were observed under confocal laser microscope. The results of immunofluorescence showed that the expression of H3K4me3 was observed in porcine oocytes at different meiosis stages, and the expression of H3K4me3 decreased gradually. The expression of H3K9me3 was found in the oocytes at the stage of foaming stage, late foaming stage (L-GV) and foaming rupture stage (GVBDD), and disappeared with the meiosis of meiosis, and the expression of H3K9me3 disappeared with the meiosis, and the expression of H3K9me3 disappeared with the development of meiosis. No H3K9me3 fluorescence signal. H3K4me3 and H3K9me3 were expressed in porcine cloned embryos at different stages of development. The fluorescence intensity of H3K4me3 was similar in different stages of embryos. The fluorescence intensity of H3K9me3 decreased in four-cell embryos and increased in morula and blastocyst. These results suggest that H3K4me3 is involved in the regulation of porcine oocyte maturation in vitro. H3K4me3 and H3K9me3 may play a regulatory role in the early development of porcine somatic nuclear transfer embryos.
【作者單位】： 廣西大學(xué)亞熱帶農(nóng)業(yè)生物資源保護與利用國家重點實驗室;柳州市人民醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31560632) 廣西自然科學(xué)基金(2014GXNSFAA118084,2014GXNSFAA118099,2016GXNSFDA380030)
【分類號】：S828

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