微小隱孢子蟲TSP3蛋白的定位分析
本文選題:微小隱孢子蟲 + 多肽��; 參考:《吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年02期
【摘要】:通過對微小隱孢子蟲TSP3氨基酸序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析設(shè)計(jì)多肽片段,偶聯(lián)KLH載體蛋白免疫家兔制備多克隆抗體,采用間接ELISA方法檢測血清效價(jià)并利用特異性親和層析的方法純化抗體。以該抗體作為一抗,利用Western blot檢測蟲體天然蛋白質(zhì)在體內(nèi)的表達(dá)情況,通過間接免疫熒光方法進(jìn)行亞細(xì)胞定位分析。結(jié)果表明:制備的多克隆抗體能夠特異性識別蟲體天然蛋白,亞細(xì)胞定位發(fā)現(xiàn)其位于子孢子以及裂殖子的頂端。
[Abstract]:The peptide fragment was designed by bioinformatics analysis of the amino acid sequence of Cryptosporidium minimus TSP3. The rabbit was immunized with KLH carrier protein to prepare polyclonal antibody. The titer of serum was detected by indirect Elisa and the antibody was purified by specific affinity chromatography. Using the antibody as the first antibody, the expression of natural protein in the insect body was detected by Western blot, and the subcellular localization was analyzed by indirect immunofluorescence method. The results showed that the prepared polyclonal antibodies could specifically recognize the natural proteins of the insect body, and the subcellular localization revealed that they were located at the top of the sporozoite and merozoite.
【作者單位】: 吉林大學(xué)人獸共患病研究所人獸共患病研究教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31272549)
【分類號】:S852.7
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,本文編號:2041486
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