本文選題：雞新城疫病毒 + 單克隆抗體��； 參考：《河南農(nóng)業(yè)科學(xué)》2017年01期

【摘要】：采用差速離心法純化雞新城疫病毒(NDV)標(biāo)準(zhǔn)毒株F48E8,免疫Balb/c小鼠,應(yīng)用雜交瘤細(xì)胞技術(shù)制備抗NDV單克隆抗體,旨在為NDV中和抗原表位分析奠定基礎(chǔ)。將NDV感染BHK-21細(xì)胞,建立異源免疫過氧化物酶單層細(xì)胞試驗(yàn)(IPMA)的單克隆抗體檢測方法,篩選獲得14株分泌抗NDV單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株,其單克隆抗體腹水IPMA效價(jià)均在0.50×10-2~2.56×10-5(F48E8株和La Sota株)。血凝抑制試驗(yàn)(HI)結(jié)果表明,單克隆抗體1G6、2C1、4D2、5F2和13A5具有血凝抑制活性,其HI效價(jià)在(6~12)log2(F48E8株)和(9~11)log2(La Sota株)。病毒中和試驗(yàn)結(jié)果表明,單克隆抗體5F2和13A5對(duì)F48E8株和La Sota株均有明顯的病毒中和活性,中和效價(jià)分別為1∶400~1∶800和1∶25。夾心ELISA結(jié)果表明,單克隆抗體5F2識(shí)別NDV HN蛋白,13A5識(shí)別F蛋白。綜上,成功制備了具有中和活性的NDV單克隆抗體(5F2和13A5)。
[Abstract]:The standard strain F48E8 of Newcastle disease virus (NDV) was purified by differential centrifugation. Balb / c mice were immunized. Monoclonal antibodies against NDV were prepared by hybridoma cell technique in order to lay a foundation for the neutralization epitope analysis of NDV. BHK-21 cells were infected with NDV, and a monoclonal antibody assay was established for the detection of IPMA. Fourteen hybridoma cell lines secreting anti-NDV monoclonal antibodies were obtained. The titers of monoclonal antibody IPMA in ascites were 0.50 脳 10 ~ (-2) and 2.56 脳 10 ~ (-5) F _ (48) E _ (8) and La Sota strains respectively. The results of hemagglutination inhibition test (HI) showed that monoclonal antibody 1G6O2C1O4D2O5F2 and 13A5 had hemagglutination inhibitory activity, and the HI titers of the two antibodies were compared with that of Y6G612log2F48E8 strain. The results of neutralization test showed that monoclonal antibodies 5F2 and 13A5 had obvious viral neutralization activities against F48E8 strain and La Sota strain, the neutralization titers were 1: 400, 1: 800 and 1: 25, respectively. Sandwich Elisa showed that monoclonal antibody 5F2 recognized NDV HN protein 13A5 and recognized F protein. In conclusion, neutralizing NDV monoclonal antibodies 5F2 and 13A5 were successfully prepared.
【作者單位】： 河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物免疫學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)與信息研究所;河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院;江蘇高校動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2016YFD0500800) 公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201303033) 河南省科技攻關(guān)項(xiàng)目(162102110051)
【分類號(hào)】：S852.65

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3 ;世界上最大的單克隆抗體生產(chǎn)廠[J];生物工程學(xué)報(bào);1987年02期

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3 廣凱;單克隆抗體藥物將有大發(fā)展[N];中國醫(yī)藥報(bào);2000年

4 ;單克隆抗體應(yīng)用前景看好[N];中國醫(yī)藥報(bào);2002年

5 黃東臨;羅氏叱咤單克隆抗體市場[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年

6 ;單克隆抗體異軍突起[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2003年

7 尹暉;全球最大單克隆抗體研制基地落戶無錫[N];中國醫(yī)藥報(bào);2010年

8 尹暉;最大單克隆抗體研制項(xiàng)目在馬山奠基[N];無錫日報(bào);2010年

9 數(shù)文;羅氏買進(jìn)抗癌單克隆抗體[N];中國醫(yī)藥報(bào);2008年

10 毛文波;單克隆抗體：征服癌癥的新方法[N];科技日報(bào);2004年

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3 張瀟;抗EV71病毒單克隆抗體及柯薩奇病毒病毒樣顆粒的制備研究[D];北京工業(yè)大學(xué);2015年

4 鄒年莉;雞傳染性支氣管炎病毒Sczy3 S1蛋白中和性單克隆抗體的制備及其抗原表位的鑒定[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

5 程林;人△42PD1特異性單克隆抗體的制備及其免疫功能的初步探討[D];南京大學(xué);2014年

6 王海;直腸癌上調(diào)表達(dá)蛋白eEF2單克隆抗體制備及臨床應(yīng)用[D];吉林大學(xué);2016年

7 孫佳善;禽流感、新城疫和犬瘟熱病毒單克隆抗體篩選策略比較及應(yīng)用研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

8 胡新韜;HIV-1B'和CRF07_BC慢性感染者中和抗體應(yīng)答特征及CD4bs抗原特異性單克隆抗體分離鑒定初步研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2012年

9 白宇;馬γ-干擾素單克隆抗體的制備及細(xì)胞免疫評(píng)價(jià)方法的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2008年

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