本文選題：ELISA + 檢測效果�。� 參考：《中國獸藥雜志》2017年06期

【摘要】：為研究不同抗原對豬瘟病毒抗體ELISA檢測效果的影響,通過原核表達(dá)獲取豬瘟病毒重組E2蛋白、E0蛋白、C蛋白和NS5B蛋白,大小分別約為35、42、16和80 kD。經(jīng)Ni-NTA親和層析柱純化并利用Band Scan軟件進(jìn)行計算,純度均在90%以上,滿足ELISA檢測包被用原料純度的要求。將上述4種蛋白作為包被抗原進(jìn)行ELISA,以10份企業(yè)陽性質(zhì)控品血清和10份企業(yè)陰性質(zhì)控品血清為檢驗指標(biāo)比較不同抗原對豬瘟病毒抗體ELISA檢測效果的影響。結(jié)果以E2蛋白為原料的包被板檢測質(zhì)控血清時,靈敏度和特異性均達(dá)到80%以上,能夠滿足豬瘟病毒抗體ELISA檢測的要求,故選擇E2蛋白作為包被抗原并進(jìn)行相關(guān)檢測試劑的研制。用研制的試劑與國際知名度高、產(chǎn)品質(zhì)量好的美國IDEXX同類試劑對432份臨床豬血清進(jìn)行符合性檢測,結(jié)果與美國IDEXX試劑的陽性符合率為95.53%,陰性符合率為86.56%,總符合率為91.67%,兩種試劑檢測結(jié)果具有較高的一致性。試驗表明,用E2蛋白為包被抗原對豬瘟病毒抗體進(jìn)行ELISA檢測的效果最好,制備的檢測試劑可用于臨床豬瘟病毒血清抗體的檢測,為今后豬瘟病毒抗體ELISA檢測試劑的進(jìn)一步研制奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to study the effect of different antigens on the detection effect of swine fever virus antibody ELISA, recombinant E2 protein, E0 protein, C protein and NS5B protein were obtained by prokaryotic expression. The size was purified by Ni-NTA affinity chromatography column of 35,42,16 and 80 kD., respectively, and the purity was above 90%, which met the ELISA detection package. With the requirements of the purity of the raw materials, the above 4 proteins were used as the envelope antigen to be ELISA, the positive quality control serum of 10 enterprises and the serum of 10 negative quality control products were used as the test indexes to compare the effect of different antigens on the detection effect of swine fever virus antibody ELISA. The specificity is above 80%, and can meet the requirements of the detection of the antibody ELISA of the swine fever virus. So E2 protein is selected as the envelope antigen and the related detection reagents are developed. The developed reagents and the United States IDEXX reagents with high international popularity and good product quality test the conformance of 432 clinical pig serum, and the result is with the American IDEXX. The positive coincidence rate of the reagent was 95.53%, the negative coincidence rate was 86.56%, the total coincidence rate was 91.67%. The test results of the two reagents had high consistency. The test showed that the E2 protein as the envelope antigen had the best effect on the detection of swine fever virus antibody by ELISA, and the prepared detection reagent could be used for the detection of serum antibody in the clinical swine fever virus. The further development of ELISA detection reagent for swine fever virus antibody laid the foundation.
【作者單位】： 鄭州中道生物技術(shù)有限公司;河南中標(biāo)檢測服務(wù)有限公司;鄭州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【分類號】：S858.28

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本文編號：2020319