本文選題：GGTA1 + 基因敲除　； 參考：《甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：為了探討GGTA1基因敲除巴馬克隆豬與核供體巴馬豬全身主要器官組織的解剖學(xué)與組織學(xué)發(fā)育變化異同,本試驗(yàn)選擇GGTA1基因敲除巴馬克隆豬2頭(BM164和BM155)及核供體巴馬豬1頭(BMM2),利用大體解剖學(xué)方法對(duì)心臟、肝臟、脾臟、肺臟及腎臟進(jìn)行了對(duì)比觀察,利用組織學(xué)技術(shù)對(duì)大腦、小腦、心臟、皮膚、脾臟、淋巴結(jié)、甲狀腺、腎上腺、腦垂體、食管、胃、腸、肝臟、胰腺、唾液腺、肺臟、腎臟以及輸卵管和子宮等全身主要器官組織進(jìn)行了比較研究,結(jié)果如下:1.解剖學(xué)比較結(jié)果核供體巴馬豬心臟呈倒置圓錐形;肝臟為紅褐色,可分為兩面兩緣四葉;脾臟為紫紅色,鐮刀形;肺臟呈海綿狀粉紅色,質(zhì)軟而輕,富有彈性;腎臟為平滑多乳頭腎,左右對(duì)稱,呈豆?fàn)睢Ｅc核供體巴馬豬相比,GGTA1基因敲除巴馬克隆豬的心臟、肝臟、肺臟、腎臟及BM164號(hào)巴馬豬脾臟的解剖學(xué)特征均無明顯差異,但BM155號(hào)巴馬豬脾臟有異常,其形態(tài)腫大且呈黑紫色。2.組織學(xué)比較結(jié)果與核供體巴馬豬相比,GGTA1基因敲除巴馬克隆豬全身主要器官的組織結(jié)構(gòu)總體無顯著差異,但也存在一些不同,具體如下:免疫系統(tǒng)中核供體巴馬豬和BM164號(hào)巴馬豬脾臟結(jié)構(gòu)良好,發(fā)育正常,其內(nèi)白髓和紅髓分界明顯,脾小體典型而豐富。但BM155號(hào)巴馬豬脾臟脾小體組織結(jié)構(gòu)不清晰,出血嚴(yán)重,嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞增多,網(wǎng)狀纖維連接斷續(xù)。消化系統(tǒng)中BM164號(hào)巴馬豬空腸組織結(jié)構(gòu)不完整,缺少肌層和漿膜;BM155號(hào)巴馬豬腸管各段及胰腺出現(xiàn)了不同程度的結(jié)構(gòu)變化,其十二指腸、空腸、盲腸、結(jié)腸的黏膜及黏膜下層內(nèi)均可見較多的血細(xì)胞,結(jié)腸較發(fā)達(dá),胰腺小葉間隔較大,間隔內(nèi)可見大量脂肪組織,小葉被分割成數(shù)小塊。BM164與BM155號(hào)巴馬豬直腸均較BMM2號(hào)巴馬豬發(fā)育良好。泌尿系統(tǒng)中核供體巴馬豬腎臟結(jié)構(gòu)良好。BM164和BM155號(hào)巴馬豬腎臟組織結(jié)構(gòu)總體完整,但在腎小球與腎小管中可見大量血細(xì)胞,腎小管上皮細(xì)胞出現(xiàn)輕微脫落壞死的現(xiàn)象。其它各系統(tǒng)器官組織包括大腦、小腦、心臟、皮膚、淋巴結(jié)、甲狀腺、腎上腺、腦垂體食管、胃、肝臟、唾液腺、肺臟、輸卵管及子宮等的組織結(jié)構(gòu)均發(fā)育正常。上述結(jié)果提示利用現(xiàn)有的基因工程和動(dòng)物克隆技術(shù),可以得到主要器官組織發(fā)育正常的克隆巴馬豬個(gè)體,并有望成為異種器官移植的良好平臺(tái)與載體。但同時(shí),本試驗(yàn)中克隆巴馬豬個(gè)體的部分器官組織也出現(xiàn)了不同程度的結(jié)構(gòu)變化,這可能與個(gè)體差異因素有關(guān),其具體機(jī)制尚有待進(jìn)一步研究和探討。
[Abstract]:In order to study the anatomical and histological changes of the main organs and tissues of GGTA1 knockout cloned pig and nuclear donor pig, GGTA1 gene knockout Bama clone pigs (2 BM-164 and BM155) and nuclear donor BMM2P were used to observe the heart, liver, spleen, lung and kidney. The cerebellum and cerebellum were observed by histological technique. Heart, skin, spleen, lymph nodes, thyroid gland, adrenal gland, pituitary gland, esophagus, stomach, intestine, liver, pancreas, salivary gland, lung, kidney, oviduct and uterus were compared. The results were as follows: 1. Anatomical comparison showed that the heart of the nuclear donor was inverted conical; the liver was reddish brown and could be divided into two sides and four leaves; the spleen was purplish red and sickle shaped; the lung was spongy pink with soft light and elastic nature. Kidney is smooth polypapillary kidney, left and right symmetrical, beanlike. The anatomical characteristics of the heart, liver, lung, kidney and spleen of Bama pig with GGTA1 gene knockout were not significantly different from those of Bama pig, but the spleen of Bama pig BM155 was abnormal. There was no significant difference in the tissue structure of GGTA1 knockout major organs in the whole body compared with the nuclear donor Bama pig, but there were some differences in the tissue structure of the GGTA1 gene knockout pig. The main results are as follows: the spleen of Bama pig and BM164 pig in the immune system has good structure and normal development. The boundary between white pulp and red pulp is obvious and the splenic corpuscles are typical and abundant. However, the spleen splenic corpuscles of Bama pig BM155 were not clear, bleeding seriously, eosinophils and neutrophils increased, and reticular fibers were connected intermittently. In the digestive system, the jejunum of Bama pig BM164 was not complete, and there were some structural changes in the duodenum, jejunum and cecum of Bama pig without muscle layer, serosa BM155 and pancreas. More blood cells were found in the mucous membrane and submucous layer of the colon. The colon was more developed and the pancreatic interlobular septum was larger. A large amount of adipose tissue could be seen in the septum. The lobules were divided into several pieces. BM164 and BM155 Bama pig rectum developed better than BMM2 Bama pig. In the urinary system, the renal structure of the nuclear donor Bama pig. BM164 and BM155 were generally intact, but a large number of blood cells were found in the glomeruli and renal tubules, and the epithelial cells of the renal tubules showed slight exfoliation and necrosis. The tissues of other organs including brain cerebellum heart skin lymph node thyroid adrenal gland pituitary esophagus stomach liver salivary gland lung fallopian tube and uterus developed normally. These results suggest that the existing genetic engineering and animal cloning techniques can be used to clone Bama pig individuals with normal development of major organs and tissues, and it is expected to be a good platform and vector for xenotransplantation. But at the same time, some organs and tissues of Bama pig cloned in this experiment also showed different degree of structural changes, which may be related to individual differences, and its specific mechanism needs to be further studied and discussed.
【學(xué)位授予單位】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S828

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本文編號(hào)：2018106