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奶牛隱性乳房炎乳房鏈球菌巢式PCR檢測方法的建立

發(fā)布時間:2018-06-09 15:14

  本文選題:奶牛 + 隱性乳房炎 ; 參考:《云南農(nóng)業(yè)大學學報(自然科學)》2016年05期


【摘要】:為研究巢式PCR檢測奶牛隱性乳房炎鏈球菌的靈敏度,以本實驗室從新鮮奶樣中分離并經(jīng)過生理生化鑒定的乳房鏈球菌、無乳鏈球菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌為研究對象,提取細菌DNA,采用巢式PCR技術(shù),根據(jù)細菌16S rRNA序列保守區(qū)設(shè)計通用引物進行第1次PCR擴增,再在乳房鏈球菌16S rRNA保守區(qū)內(nèi)的可變區(qū)設(shè)計特異引物對4種病原菌進行第2次PCR檢測。結(jié)果表明:巢式PCR技術(shù)能檢測出乳房鏈球菌16S rRNA保守區(qū)的可變區(qū)序列,與生理生化鑒定結(jié)果一致。該方法能快速有效檢測出奶牛隱性乳房炎乳房鏈球菌。
[Abstract]:In order to study the sensitivity of nested PCR for detection of recessive Streptococcus mastitis in dairy cattle, Streptococcus breast-streptococcus, streptococcus acidis, Escherichia coli and Staphylococcus aureus isolated from fresh milk samples and identified by physiology and biochemistry in our laboratory were used as research objects. The bacterial DNA was extracted by nested PCR, and a universal primer was designed according to the conserved region of 16s rRNA sequence for the first PCR amplification. Then the specific primers were designed in the variable region of 16s rRNA conserved region of Streptococcus brevis for the second PCR detection of four pathogens. The results showed that nested PCR could detect the variable region of 16s rRNA conserved region of Streptococcus brevis, which was consistent with the result of physiological and biochemical identification. This method can detect recessive mastitis breast streptococcus quickly and effectively.
【作者單位】: 紅河學院生命科學與技術(shù)學院;云南省高校農(nóng)作物優(yōu)質(zhì)高效栽培與安全控制重點實驗室;
【基金】:云南省科技廳應用基礎(chǔ)研究面上項目(2010ZC151,2010CD088) 紅河學院博士專項項目(XJ15B13)
【分類號】:S858.23

【參考文獻】

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本文編號:2000157

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