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禽呼腸孤病毒強(qiáng)毒株和弱毒疫苗株感染Vero細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-06 02:42

  本文選題:禽呼腸孤病毒 + 強(qiáng)毒株; 參考:《畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2016年02期


【摘要】:為研究在禽呼腸孤病毒(ARV)不同毒力毒株感染后不同時(shí)間點(diǎn)宿主細(xì)胞中蛋白質(zhì)組變化,運(yùn)用雙向凝膠電泳技術(shù)和質(zhì)譜鑒定的蛋白質(zhì)組學(xué)方法,對(duì)ARV強(qiáng)毒株S1133、弱毒疫苗株aS1133感染Vero細(xì)胞和對(duì)照細(xì)胞在不同時(shí)間點(diǎn)的蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行檢測(cè)。鑒定結(jié)果表明,共鑒定出44個(gè)差異表達(dá)蛋白質(zhì),這些蛋白質(zhì)包括α-烯醇化酶(α-enolase)、過(guò)氧化物酶(Prx-4)、hnRNPs、微管蛋白(Tubulin)、蛋白磷酸酶、轉(zhuǎn)錄延伸因子等。GO軟件分析顯示這些差異蛋白質(zhì)主要參與細(xì)胞信號(hào)、細(xì)胞骨架組成、能量代謝、核酸代謝、蛋白質(zhì)折疊、細(xì)胞增殖及凋亡等生物學(xué)功能。熒光定量RT-PCR驗(yàn)證表明,hnRNP和Prx-4在S1133感染細(xì)胞中表達(dá)水平持續(xù)上調(diào),而Tubulin和α-enolase僅分別在48和24h時(shí)表達(dá)上調(diào),與雙向凝膠電泳的結(jié)果一致。以上試驗(yàn)數(shù)據(jù)揭示了ARV不同毒力毒株感染后細(xì)胞中蛋白質(zhì)表達(dá)的差異變化,有助于進(jìn)一步闡明ARV和宿主之間的相互作用。
[Abstract]:In order to study the proteome changes in host cells at different time points after infection with different virulence strains of avian reovirus ARV, two dimensional gel electrophoresis and proteomics methods were used to identify ARV. The protein samples of Vero cells infected with ARV virulent strain S1133 and attenuated vaccine strain aS1133 and control cells at different time points were detected. The results showed that 44 differentially expressed proteins were identified, including 偽 -enolase (偽 -enolase), peroxidase (Prx-4), tubulin (tubulin), protein phosphatase (Phosphatase). Analysis of transcriptional extender and other .go software showed that these differential proteins were mainly involved in cell signal, cytoskeleton composition, energy metabolism, nucleic acid metabolism, protein folding, cell proliferation and apoptosis, and other biological functions. Fluorescence quantitative RT-PCR analysis showed that the expression of Tubulin and 偽 -enolase were up-regulated in S1133 infected cells, while the expression of Tubulin and 偽 -enolase were only up-regulated at 48 and 24 hours, respectively, which was consistent with the results of two-dimensional gel electrophoresis. The above experimental data revealed the difference of protein expression in the cells infected with different virulence strains of ARV, which was helpful to further clarify the interaction between ARV and host.
【作者單位】: 廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所廣西畜禽疫苗新技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(31160512) 廣西自然科學(xué)基金(2014GXNSFCA118006) 廣西特聘專家專項(xiàng)(2011B020) 廣西水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)局科技項(xiàng)目(桂漁牧科201452003)
【分類號(hào)】:S855.3

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本文編號(hào):1984684

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