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雞細(xì)小病毒半巢式PCR檢測方法的建立及初步應(yīng)用

發(fā)布時間:2018-06-05 18:16

  本文選題:雞細(xì)小病毒 + 半巢式PCR。 參考:《中國畜牧獸醫(yī)》2017年05期


【摘要】:為建立一種快速、特異、靈敏的檢測雞細(xì)小病毒(chicken parvovirus,ChPV)的方法,根據(jù)ChPV的保守基因NS1設(shè)計了3條特異性引物,建立并優(yōu)化了能快速檢測ChPV的半巢式PCR方法,對其進(jìn)行特異性和敏感性試驗,并用所建立的方法對48份臨床樣品進(jìn)行了檢測。特異性和敏感性試驗結(jié)果顯示,建立的半巢式PCR只對ChPV敏感,擴(kuò)增產(chǎn)物為186bp的特異性條帶;其最低能檢測到5.62fg/μL的ChPV DNA;而對雞新城疫病毒、H9亞型禽流感病毒、馬立克氏病病毒、雞傳染性喉氣管炎病毒、雞傳染性支氣管炎病毒不敏感。臨床檢測結(jié)果顯示,同時對48份臨床樣品進(jìn)行檢測,檢出率為16.67%(8/48),提示廣西區(qū)內(nèi)雞群存在ChPV感染。本研究建立的ChPV半巢式PCR方法適用于ChPV的臨床檢測。
[Abstract]:In order to establish a rapid, specific and sensitive method for the detection of chicken parvovirus (ChPV), three specific primers were designed according to the conserved gene NS1 of ChPV, and a semi-nested PCR method was established and optimized for rapid detection of ChPV. The specificity and sensitivity were tested and 48 clinical samples were detected by the established method. The results of specificity and sensitivity tests showed that the semi-nested PCR was only sensitive to ChPVs, and the amplified product was a specific band of 186bp. The lowest 5.62fg/ 渭 L 5.62fg/ DNA could be detected, while the H9 subtype avian influenza virus of Newcastle disease virus, Marek's disease virus, was detected. Chicken infectious laryngotracheitis virus, chicken infectious bronchitis virus is insensitive. The results of clinical examination showed that 48 clinical samples were detected and the detection rate was 16.67% / 48%, indicating that ChPV infection existed in chickens in Guangxi. The semi-nested PCR method developed in this study is suitable for clinical detection of ChPV.
【作者單位】: 廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所廣西獸醫(yī)生物技術(shù)重點實驗室;南寧市良鳳農(nóng)牧有限責(zé)任公司;
【基金】:廣西科技項目(15-140-31-A-1、15-140-31-B-1、桂科AB16380003) 南寧市科技攻關(guān)項目(20152308) 國家“萬人計劃”領(lǐng)軍人才專項(2016-37-88)
【分類號】:S858.31

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本文編號:1982969

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