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H9N2亞型禽流感病毒血凝素單克隆抗體的制備及生物學特性分析

發(fā)布時間:2018-06-02 10:38

  本文選題:HN + 禽流感; 參考:《中國家禽》2017年21期


【摘要】:1994年以來,H9N2亞型禽流感病毒(AIV)在中國廣泛流行,給養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大損失。病毒已表現(xiàn)出明顯的遺傳和抗原多樣性,但是對于其抗原性的演化研究較少。本研究選取2014年H9N2亞型AIV分離株A/chicken/Jiangsu/TM118/2014制備針對其血凝素的單克隆抗體,共獲得8株穩(wěn)定分泌針對血凝素蛋白的雜交瘤細胞,分別命名為4B6、3F2、6D11、6B5、1H6、1G6、2D11、3D2,腹水HI效價在2~(11)~2~(19)之間;特異性鑒定結果顯示,8株單克隆抗體僅特異針對H9亞型禽流感病毒,而與其他亞型禽流感病毒及其他感染家禽的常見病毒不反應;廣譜性分析顯示,6D11可以與所選毒株的絕大部分反應,其它7株與不同年代、不同譜系的反應性不同;8株單克隆抗體均能與感染H9亞型禽流感病毒的MDCK細胞特異性反應,呈現(xiàn)綠色熒光。本研究所獲得的單克隆抗體可在H9亞型禽流感病毒的抗原性位點分析、流行病學監(jiān)測及臨床檢測中發(fā)揮重要作用。
[Abstract]:H9N2 subtype avian influenza virus (AIV) has been widespread in China since 1994 and caused great losses to the poultry industry. The virus has shown obvious genetic and antigenic diversity, but the evolution of its antigenicity is less studied. In this study, monoclonal antibodies against hemagglutinin were prepared from A/chicken/Jiangsu/TM118/2014, a 2014 H9N2 subtype AIV isolate, and 8 hybridoma cells stably secreting hemagglutinin protein were obtained, named as 4B6O3F2F2F2F2O6D11D113D2, and the HI titer of ascitic fluid was in the range of 2B6112D113D2. The results of specific identification showed that the monoclonal antibodies of 8 strains were only specific against H9 avian influenza virus, but not against other subtype avian influenza viruses and other common viruses infected with poultry. The results of broad-spectrum analysis showed that H9 subtype Avian Influenza virus (H9) subtype Avian Influenza virus (Avian Influenza virus) could specifically react with the monoclonal antibodies of the other 7 strains and the different strains of different lineages, and 8 strains of McAbs could react specifically with the MDCK cells infected with H9 subtype Avian Influenza virus. Present green fluorescence. The monoclonal antibodies obtained in this study can play an important role in the analysis of antigenic loci, epidemiological monitoring and clinical detection of H9 subtype avian influenza virus.
【作者單位】: 揚州大學獸醫(yī)學院動物傳染病實驗室;江蘇省人獸共患病學重點實驗室;
【基金】:“十二五”國家科技支撐計劃項目(2015BAD12B01-3)
【分類號】:S852.4

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