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數字RT-PCR技術檢測H3N2亞型豬流感病毒方法的建立

發(fā)布時間:2018-05-29 15:46

  本文選題:豬流感病毒 + HN亞型。 參考:《中國畜牧獸醫(yī)》2017年06期


【摘要】:試驗旨在利用新型熒光探針——分子信標,建立一種檢測豬流感病毒的新方法。根據H3N2亞型豬流感病毒(swine influenza virus,SIV)的H3和N2基因的保守基因序列,分別設計并合成了特異性引物和分子信標探針,利用數字RT-PCR技術檢測H3N2亞型SIV。結果顯示,該數字RT-PCR檢測方法與其他主要相關病毒均不發(fā)生交叉反應,重復性良好;對豬H3N2流感病毒而言,最低可檢測到106倍稀釋的病毒株。數字RT-PCR方法能夠對RNA模板定量分析。在H3N2SIV的鑒定上,數字RT-PCR方法較實時熒光定量PCR方法更靈敏、準確。
[Abstract]:The experiment aims to establish a new method for detecting swine influenza virus by using a new fluorescent probe molecular beacon. The specific primers and molecular beacon probes are designed and synthesized according to the conservative gene sequences of the H3 and N2 genes of the H3N2 Subtype Swine Influenza Virus (swine influenza virus, SIV), and the detection of H3N2 subtype S using digital RT-PCR technology. IV. results showed that the digital RT-PCR detection method did not cross reaction with other major related viruses and had good reproducibility. For swine H3N2 influenza virus, 106 times the lowest dilution of the virus strain was detected. The digital RT-PCR method could be used for quantitative analysis of RNA template. In the identification of H3N2SIV, the digital RT-PCR method was more real-time than the real-time quantitative PCR. The method is more sensitive and accurate.
【作者單位】: 湖南出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心;惠州出入境檢驗檢疫局;
【基金】:國家質檢總局科技資助項目(2014IK243)
【分類號】:S852.651

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