本文選題：如皋黃雞 + 新基因LBC��； 參考：《中國獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年06期

【摘要】：克隆如皋黃雞LBC(Libichun)基因CDS區(qū),通過GFP-LBC融合蛋白和間接免疫熒光法(IFA)來實(shí)現(xiàn)該基因的亞細(xì)胞定位,為其基因功能研究奠定基礎(chǔ)。提取如皋黃雞18日齡的雞胚睪丸RNA,巢式PCR方法擴(kuò)增LBC基因的CDS區(qū),構(gòu)建真核表達(dá)載體pEGFP-N1-LBC轉(zhuǎn)染DF-1細(xì)胞,48h后觀察其綠色熒光表達(dá)情況,同時(shí)制備LBC基因的多克隆抗體,利用IFA標(biāo)記LBC基因的表達(dá)部位。本研究成功克隆出如皋黃雞LBC基因的完整編碼區(qū),成功制備抗體和構(gòu)建pEGFP-N1-LBC、pcDNA3.0-LBC。GFP-LBC融合蛋白和IFA的結(jié)果顯示,如皋黃雞LBC基因在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中都有表達(dá),為下一步LBC基因的功能研究奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Clone Rugao yellow chicken LBC (Libichun) gene CDS region, through GFP-LBC fusion protein and indirect immunofluorescence (IFA) to realize the subcellular localization of the gene, and lay the foundation for its gene function research. Extract RNA of chicken embryo from 18 day old chicken embryo of Rugao yellow chicken and amplify CDS region of LBC gene by nested PCR method and construct eukaryotic expression vector pEGFP-N1-LBC transfection. DF-1 cells, after 48h, observe its green fluorescence expression, and prepare polyclonal antibody of LBC gene, and use IFA to mark the expression site of LBC gene. This study successfully cloned the complete coding region of the LBC gene of Rugao yellow chicken. The successful preparation of antibodies and the construction of pEGFP-N1-LBC, pcDNA3.0-LBC.GFP-LBC fusion protein and IFA showed that Rugao yellow was yellow. The chicken LBC gene is expressed in both cytoplasm and nucleus, which lays the foundation for further research on the function of LBC gene.
【作者單位】： 揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院江蘇省動(dòng)物遺傳繁育與分子設(shè)計(jì)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31301959,31272429,31472087) 高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金資助課題資助項(xiàng)目(20123250120009) 中國博士后基金資助項(xiàng)目(2012M511326,2014T70550) 江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目 大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃資助項(xiàng)目(201411117033Z)
【分類號(hào)】：S831

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 陳卓;劉家駒;畢亮;李向陽;胡德禹;于丹丹;王貞超;楊松;宋寶安;;NPR1多肽抗體的制備和應(yīng)用[J];生物技術(shù)通報(bào);2012年01期

2 符芳;李曦;李雪松;李海忠;陳欣;王偉;魏萍;;豬圓環(huán)病毒2型衣殼蛋白(Cap)在293T細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2010年05期

3 張舍郁;程安春;汪銘書;沈嬋娟;李傳峰;;間接免疫熒光檢測石蠟切片中鴨腫頭出血癥病毒及抗原定位方法的初步建立[J];中國農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年03期

4 董華;王軍軍;應(yīng)天翼;李霆;王恒j;許彩民;;一種同時(shí)提取細(xì)胞總RNA和總蛋白的方法[J];生物技術(shù)通訊;2005年06期

5 李杰之,常曉彤,林堅(jiān),黃翠芬,周建光;從動(dòng)物組織提取高純度總RNA方法的改進(jìn)及應(yīng)用[J];生物技術(shù)通訊;2002年05期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李東;王飛;紀(jì)艷芹;汪怡臨;王曼;張晨;王穎潔;何娜娜;靳鍇;路鎮(zhèn)宇;程少澤;張亞妮;李碧春;;如皋黃雞功能未知基因C1EIP表達(dá)載體的構(gòu)建及其抗小鼠血清制備[J];中國獸醫(yī)學(xué)報(bào);2017年06期

2 路鎮(zhèn)宇;王穎潔;王飛;紀(jì)艷芹;何娜娜;靳楷;左其生;李東;張亞妮;李碧春;;如皋黃雞新基因LBC多抗的制備及其亞細(xì)胞定位[J];中國獸醫(yī)學(xué)報(bào);2017年06期

3 靳鍇;余昕健;趙瑞豐;王穎潔;左其生;張亞妮;李碧春;;雞CREPT基因的克隆及其在雞DF-1細(xì)胞中的表達(dá)[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào);2017年02期

4 徐洪衛(wèi);張晨光;金磊;;2種方法從大鼠晶狀體中提取總RNA及評(píng)測[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2014年35期

5 Wenxiu WANG;Sufang LU;Shijun FU;Guangjun GUO;Ling MO;Yueqiang XIAO;Zhiqiang SHEN;;Expression of Porcine Circovirus Type 2 ORF2 Gene in Myocardial Cells of Detached Cherry Valley Duck[J];Agricultural Biotechnology;2014年05期

6 朱睿;張振韜;左其生;劉志永;韋光輝;李東;連超;張亞妮;李碧春;;蘇禽黃雞CVH基因真核表達(dá)載體構(gòu)建及亞細(xì)胞定位[J];中國畜牧雜志;2014年09期

7 孟浩;彭貞;王闖;劉瑞蘭;高慶華;;血液總RNA提取方法的比較[J];塔里木大學(xué)學(xué)報(bào);2014年01期

8 師潤;呂文強(qiáng);陳陸;楊霞;劉紅英;余秋穎;明星;王川慶;;雛雞腸組織β1基因的鑒定及時(shí)空表達(dá)特性[J];中國獸醫(yī)學(xué)報(bào);2014年01期

9 袁紅花;王珍珍;陳仁金;胡安康;張騰業(yè);吳連連;冀德君;朱孝榮;;HA蛋白多肽抗體的設(shè)計(jì)、制備與鑒定[J];家畜生態(tài)學(xué)報(bào);2013年12期

10 胡麗麗;趙小鴿;倪磊;王愛英;楊娟;;大鼠海馬組織RNA、DNA和蛋白質(zhì)共提取方法的研究[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年02期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李海忠;符芳;張永欣;李曦;宋淑萍;;Ⅱ型豬圓環(huán)病毒Cap蛋白單克隆抗體的制備及特性鑒定[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2010年05期

2 祝衛(wèi)國,宋長緒,王貴平,楊增岐,黃忠,李春玲,王旭榮;豬2型圓環(huán)病毒廣東株ORF2基因在大腸埃希氏菌中的表達(dá)[J];中國獸醫(yī)科技;2004年12期

3 戴維德,王雷,劉凡光,顧瑛,李曉松,丁新民,曾晶;應(yīng)用激光掃描共聚焦顯微成像術(shù)研究光敏劑亞細(xì)胞定位[J];中國激光醫(yī)學(xué)雜志;2004年01期

4 程安春,汪銘書,陳孝躍,周毅,劉菲,宋涌,郭宇飛,韓曉英,袁桂萍,徐超,廖永洪,方鵬飛,劉兆宇;一種新發(fā)現(xiàn)的鴨病毒性腫頭出血癥的研究[J];中國獸醫(yī)科技;2003年10期

5 張浩,周建光,孫玉龍,李杰之,袁蘭,黃翠芬;人前列腺癌相關(guān)基因pc-1表達(dá)產(chǎn)物在細(xì)胞內(nèi)的定位研究[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2001年04期

6 李丁,蘇海川,趙錦榮,范清宇,閆小君;骨組織總RNA的提取[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1999年12期

7 吳麗娟,黎燕,胡美茹,沈倍奮;改進(jìn)SDS-Phenol法快速提取細(xì)胞總RNA[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1999年01期

8 胡冬貴，黎青，華小云，林群娣，杜傳書;真核細(xì)胞質(zhì)總RNA快速提取和鑒定技術(shù)的改進(jìn)[J];中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志;1996年03期

9 宋軍，張鳴鏑，張學(xué)，金春蓮，孫開來, 唐小任;從小鼠不同組織有效提取總RNA的一種簡單方法[J];中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1995年02期

10 張宏權(quán)，，王會(huì)信，周廷沖，王允玲;從少量轉(zhuǎn)染細(xì)胞中同時(shí)快速提取總RNA和基因組DNA[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;1994年02期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 本刊編輯部;如皋蝶尾舞出一片天[J];科學(xué)養(yǎng)魚;2004年10期

2 ;如皋奏響綠色富民曲[J];江蘇農(nóng)村經(jīng)濟(jì);2006年06期

3 沈建華;解茹;;綠海行舟新如皋[J];江蘇農(nóng)村經(jīng)濟(jì);2006年06期

4 施國華;展錦波;;如皋:貫徹農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 確保農(nóng)產(chǎn)品安全[J];江蘇農(nóng)村經(jīng)濟(jì);2006年11期

5 湯新明;;如皋推進(jìn)農(nóng)民集中居住新模式[J];江蘇農(nóng)村經(jīng)濟(jì);2007年06期

6 陳水兵;;如皋雙芯回風(fēng)灶[J];可再生能源;1986年04期

7 ;如皋農(nóng)村新鮮事 以鵝代狗看家門[J];新農(nóng)業(yè);1996年11期

8 陳昌軍;;如皋“大旱小災(zāi)”凸顯治水成效[J];江蘇農(nóng)村經(jīng)濟(jì);2007年07期

9 石亞全;何敏;;如皋蝶尾舞出一片天 如皋市觀賞魚品牌打造及發(fā)展之路[J];內(nèi)陸水產(chǎn);2007年11期

10 ;美麗富饒的如皋[J];農(nóng)產(chǎn)品市場周刊;2004年40期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 ;如皋傳媒集團(tuán)與上戲簽訂戰(zhàn)略合作協(xié)議[A];《中國木偶皮影》總第23期[C];2013年

2 周虎躍;;如皋木偶藝術(shù)的當(dāng)代發(fā)展策略[A];如皋·首屆全國木偶皮影藝術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

3 ;如皋全國木偶皮影藝術(shù)研討暨惠民展演[A];《中國木偶皮影》總第23期[C];2013年

4 ;如皋·首屆全國木偶皮影藝術(shù)研討會(huì)[A];如皋·首屆全國木偶皮影藝術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

5 姜尚禮;;如皋木偶藝術(shù)的傳承發(fā)展與保護(hù)[A];如皋·首屆全國木偶皮影藝術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

6 陳亦駿;;關(guān)于如皋杖頭木偶藝術(shù)傳承與發(fā)展的實(shí)踐與思考[A];如皋·首屆全國木偶皮影藝術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

7 劉莉;;如皋木偶藝術(shù)與廉政文化融合的實(shí)踐探索與前景展望[A];如皋·首屆全國木偶皮影藝術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

8 ;如皋·首屆全國木偶皮影藝術(shù)研討暨惠民展演活動(dòng)剪影[A];如皋·首屆全國木偶皮影藝術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

9 陳曉東;;大力扶持如皋木偶藝術(shù)的傳承和發(fā)展——在如皋·首屆全國木偶皮影藝術(shù)研討暨惠民展演開幕式上的致辭(代序)[A];如皋·首屆全國木偶皮影藝術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

10 陳曉東;;陳市長在開幕式上的致辭[A];《中國木偶皮影》總第23期[C];2013年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 顧新東;如皋香腸誤遭“毒”打[N];新華日?qǐng)?bào);2004年

2 本報(bào)記者 裔兆宏;如皋打造華東第一花木之都[N];江蘇經(jīng)濟(jì)報(bào);2006年

3 本報(bào)特派記者組;如皋學(xué)趕張家港[N];南通日?qǐng)?bào);2007年

4 ;如皋：開啟大港新時(shí)代[N];新華日?qǐng)?bào);2008年

5 記者施曄;如皋支持大學(xué)生村官創(chuàng)業(yè)受表彰[N];南通日?qǐng)?bào);2009年

6 周思璋;近現(xiàn)代史上的如皋商會(huì)[N];南通日?qǐng)?bào);2010年

7 康愛華;長壽文化遺產(chǎn)與如皋[N];中國文物報(bào);2011年

8 記者 湯曉峰 通訊員 喻小津;如皋服務(wù)業(yè)打好三張?zhí)厣芭啤盵N];南通日?qǐng)?bào);2014年

9 記者高峰 姜帆;長壽的“獨(dú)到之秘”[N];檢察日?qǐng)?bào);2002年

10 李婷 高杰;如皋花木經(jīng)濟(jì)結(jié)出碩果[N];中國環(huán)境報(bào);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 陸培亞;如皋風(fēng)箏的傳承與保護(hù)研究[D];南京藝術(shù)學(xué)院;2014年

2 白寶福;明代如皋冒氏家族研究[D];西南大學(xué);2010年

3 劉剛;如皋農(nóng)村商業(yè)銀行經(jīng)營戰(zhàn)略轉(zhuǎn)型研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

本文編號(hào)：1943084