發(fā)布時(shí)間：2018-05-26 19:21

  本文選題：關(guān)中黑豬 + 精液　； 參考：《西北農(nóng)林科技大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：稀釋粉質(zhì)量決定了公豬精液稀釋后、人工授精前的質(zhì)量,繼而影響輸精后母豬的繁殖成績(jī)。由于精液受到細(xì)菌的污染是無法避免的,細(xì)菌的增殖會(huì)對(duì)精液保存造成不利影響;同時(shí)精子在保存和運(yùn)輸過程中產(chǎn)生的活性氧(ROS)和抗氧化劑之間的不平衡誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激(OS)狀態(tài)能夠損傷精子,因此稀釋粉中添加抑菌劑和抗氧化劑是常規(guī)選擇。目前市場(chǎng)上用于常溫保存豬精液的稀釋粉主要是針對(duì)瘦肉型豬種研發(fā)的,對(duì)于關(guān)中黑豬等培育品種的研究很少。本研究將抑菌劑雙乙酸鈉(SDA)和抗氧化劑曲酸(Kojic acid)應(yīng)用到關(guān)中黑豬精液的常溫保存中,通過抑菌性試驗(yàn)、精子活率、質(zhì)膜完整率、線粒體完整性、頂體完整率和總抗氧化能力(T-AOC)等指標(biāo)檢測(cè),探究SDA替代慶大霉素的可行性和曲酸對(duì)精子的保護(hù)作用,為關(guān)中黑豬精液稀釋粉的研發(fā)提供技術(shù)支持。本研究主要獲得以下結(jié)果:1.關(guān)中黑豬精液稀釋保存過程中檢測(cè)到的細(xì)菌超過100種,保存初期精液中細(xì)菌以革蘭氏陽(yáng)性菌居多:葡萄球菌科(Staphylococcus)24.13%、鏈球菌科(Streptococcus)13.39%、氣球菌科(Aerococcaceae)11.84%和芽孢桿菌科(Bacillaceae)6.91%等;隨保存時(shí)間延長(zhǎng),革蘭氏陰性菌以腸桿菌科(Enterobacteriaceae)為主的比例上升,到第5 d占絕大部分(97.76%);2.雙乙酸鈉對(duì)大腸桿菌(Escherichia coli)具有一定的抑制作用,但抑菌效果不如慶大霉素(P0.05)。在LB固體培養(yǎng)基中雙乙酸鈉對(duì)魯菲不動(dòng)桿菌(Acinetobacter lwoffii)和金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑菌圈直徑大小隨濃度增大而顯著增大(P0.05);在分別加有魯菲不動(dòng)桿菌和金黃色葡萄球菌的LB液體培養(yǎng)基中,其OD值隨雙乙酸鈉濃度增大而顯著降低(P0.05)。較高濃度(0.8 g/L)雙乙酸鈉對(duì)魯菲不動(dòng)桿菌、金黃色葡萄球菌的抑制效果與慶大霉素相近(P0.05);3.添加濃度高于0.2 g/L的雙乙酸鈉對(duì)稀釋后精液的滲透壓有顯著影響(P0.05)。BTS液中添加0~0.8 g/L雙乙酸鈉對(duì)精液保存效果呈先增后減的變化。單獨(dú)添加0.2 g/L雙乙酸鈉保存至第5 d時(shí),能有效抑制細(xì)菌生長(zhǎng),提高精子活率、質(zhì)膜、頂體和線粒體完整性(P0.05)。BTS液中添加高濃度(1 g/L)的雙乙酸鈉不利于關(guān)中黑豬精子保存;4.BTS液中添加0.2 g/L雙乙酸鈉替代40%的慶大霉素能夠達(dá)到等同于250 mg/L慶大霉素對(duì)精液的保存效果(P0.05);5.BTS液中添加0.1 g/L濃度以內(nèi)的曲酸能夠有效提高精子質(zhì)膜、頂體完整性,提升精子的總抗氧化能力(P0.05)。其中0.04 g/L濃度組保存效果最好,保存第5 d時(shí)精子活率為61.45%,可將精子有效保存時(shí)間延長(zhǎng)2 d,0.06 g/L濃度組與之差異不顯著(P0.05);6.不同濃度雙乙酸鈉+曲酸組合整體上相對(duì)于空白對(duì)照組有利于關(guān)中黑豬精子的保存,對(duì)活率、頂體完整率均有提高作用,但二者聯(lián)合使用沒有顯著的增益效果。綜上所述,關(guān)中黑豬精液常溫保存過程中出現(xiàn)的細(xì)菌中革蘭氏陰性菌呈遞增趨勢(shì),其中腸桿菌科(Enterobacteriaceae)占絕大部分;在BTS液中添加0.2 g/L雙乙酸鈉能夠替代40%的慶大霉素,對(duì)豬精液常溫保存有促進(jìn)作用;在BTS液中添加0.04 g/L曲酸能夠?qū)映乇４嫫鸬阶罴训目寡趸Ｗo(hù)效果,但雙乙酸鈉和曲酸聯(lián)用沒有顯著的增益效果。本研究結(jié)果對(duì)解決豬精液常溫保存中抗生素的耐藥性和精子的氧化損傷問題具有重要參考意義,同時(shí)為自主研發(fā)稀釋粉產(chǎn)品提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
[Abstract]:The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results showed that bacteria could not be prevented from bacterial contamination . In conclusion , the effect of adding 0 . 2g / L of sodium diacetate in BTS solution could increase the sperm membrane , the integrity of acrosome and the total antioxidant capacity of sperm .
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S828

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本文編號(hào)：1938601