融合表達(dá)禽白血病env基因和IgG-Fc基因?qū)﹄u免疫效果研究
本文選題:ALV-J + DNA疫苗 ; 參考:《中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年08期
【摘要】:為研究雞IgG-Fc作為分子佐劑是否能夠增強(qiáng)J亞群白血病病毒env基因核酸疫苗的免疫效果,本研究克隆雞IgG-Fc、禽白血病病毒-J(ALV-J)env基因,通過overlap-PCR將兩個(gè)基因串聯(lián),構(gòu)建pcDNA-env-Fc重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞,48 h后經(jīng)間接免疫熒光試驗(yàn)證明外源基因能夠在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。將pcDNA-env-Fc重復(fù)免疫SPF雞3次,記錄免疫過程中ALV-J env抗體動(dòng)態(tài)變化,通過ELISA試劑盒檢測雞體內(nèi)ALV-J env基因特異性抗體含量,結(jié)果顯示第5周ALV-J抗體水平顯著高于對(duì)照組(p0.05),尤其是IgG-Fc片段作為分子佐劑比ALV-J env基因疫苗更能顯著刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。結(jié)果表明IgG-Fc片段可以作為ALV-J env基因疫苗有效的分子佐劑。
[Abstract]:In order to study whether chicken IgG-Fc as a molecular adjuvant can enhance the immune effect of env gene nucleic acid vaccine of subgroup J leukemia virus, this study cloned chicken IgG-Fc gene and avian leukemia virus ALV-JNV gene, and constructed pcDNA-env-Fc recombinant plasmid by linking two genes by overlap-PCR. The expression of exogenous gene in HEK293T cells was confirmed by indirect immunofluorescence assay 48 h after transfection. SPF chickens were immunized with pcDNA-env-Fc for 3 times, and the dynamic changes of ALV-J env antibody were recorded. The specific antibody content of ALV-J env gene was detected by ELISA kit. The results showed that the level of ALV-J antibody in the 5th week was significantly higher than that in the control group, especially that the IgG-Fc fragment as a molecular adjuvant could significantly stimulate the production of antibodies compared with the ALV-J env gene vaccine. The results showed that IgG-Fc fragment could be used as an effective molecular adjuvant for ALV-J env gene vaccine.
【作者單位】: 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;山東省肥城市畜牧局;山東省濱州獸醫(yī)研究所;
【基金】:公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)資助(201203055) 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新工程(CXGC2017A01)
【分類號(hào)】:S852.4
【相似文獻(xiàn)】
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6 郭錦s,
本文編號(hào):1908227
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