本文選題：雙向電泳 + 冷應(yīng)激　； 參考：《動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)》2017年05期

【摘要】：本試驗(yàn)旨在比較分析雛雞冷應(yīng)激前后血清中蛋白質(zhì)的表達(dá)差異,并對重點(diǎn)差異蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定。將30只雛雞隨機(jī)分為3組,分別為冷應(yīng)激組、冷適應(yīng)組和常溫對照組,收集各組雛雞的血液制備血清后進(jìn)行雙向凝膠電泳(2-DE),以獲得血清蛋白質(zhì)表達(dá)的2-DE圖譜,對2-DE圖譜進(jìn)行差異分析(利用PDQuest 8.0軟件),隨后采用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)技術(shù)對差異表達(dá)蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定,并利用蛋白質(zhì)印跡(Western blot)方法進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果顯示:通過2-DE對常溫對照組、冷應(yīng)激組和冷適應(yīng)組雛雞血清進(jìn)行分析,得到了比較完整的差異蛋白質(zhì)數(shù)據(jù),共找到差異蛋白質(zhì)點(diǎn)23個(gè)。采用MALDI-TOF-MS技術(shù)分析其中幾個(gè)重復(fù)性好且較為明顯的蛋白質(zhì)點(diǎn),成功鑒定出4個(gè)差異蛋白質(zhì),其中2個(gè)為果糖二磷酸醛縮酶C(ALDOC),是參與葡萄糖、能量代謝通路供能的相關(guān)蛋白;隨后,對差異蛋白質(zhì)ALDOC進(jìn)行Western blot驗(yàn)證,所得結(jié)果與2-DE的結(jié)果相一致。結(jié)果表明,雛雞冷應(yīng)激前后血清中蛋白質(zhì)的表達(dá)具有明顯的差異,這些蛋白質(zhì)的表達(dá)差異可能與冷應(yīng)激有關(guān)。
[Abstract]:The purpose of this experiment was to compare and analyze the difference of serum protein expression before and after cold stress in chicks, and to identify the key differential proteins. Thirty chicks were randomly divided into three groups: cold stress group, cold acclimated group and normothermic control group. The blood samples of each group were collected to prepare serum for 2-DEG to obtain the 2-DE map of serum protein expression. The differentially expressed proteins were identified by PDQuest 8.0 software and then identified by MALDI-TOF-MS, and verified by Western blotting. The results showed that the serum of chicks in normal temperature control group, cold stress group and cold acclimation group were analyzed by 2-DE, and complete differential protein data were obtained, and 23 differential protein spots were found. MALDI-TOF-MS technique was used to analyze several protein spots with good reproducibility, and four differentially expressed proteins were successfully identified, two of which were fructose diphosphate aldolase, which was related to the energy supply of glucose and energy metabolism pathway. The differential protein ALDOC was verified by Western blot, and the result was consistent with that of 2-DE. The results showed that there were significant differences in the expression of serum proteins in chicks before and after cold stress, and the differences in the expression of these proteins might be related to cold stress.
【作者單位】： 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;
【基金】：“十三五”國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃(2016YFD0501210) 國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31272524) 農(nóng)業(yè)部948計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(2011-G35)
【分類號】：S831

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本文編號：1891097