本文選題：淫羊藿總黃酮 + 磷酸化分子修飾�。� 參考：《南京農(nóng)業(yè)大學》2015年碩士論文

【摘要】：淫羊藿(Epimedium davidii Franch)為我國傳統(tǒng)的補益中草藥,具有"益精氣,堅筋骨,補腰膝,強心力"之功效。隨著近年來對其藥理學功能的研究日益深入,我們發(fā)現(xiàn)淫羊藿總黃酮(Epimedium flavones,EF)為淫羊藿的主要藥理有效成分。諸多臨床和實驗研究表明,其具有抗病毒、抗氧化、免疫增強等效果。然而,由于黃酮類水溶性較差,在實際臨床應(yīng)用時經(jīng)常會造成一定的不便。為此,本研究著眼于提高地淫羊藿總黃酮的生物利用率,更好地發(fā)揮其抗病毒效果,為其在臨床推廣應(yīng)用服務(wù)。本研究采用磷酸化分子修飾,通過正交試驗得到最優(yōu)修飾條件,將磷酸根取代其本身的羥基,形成磷酸化淫羊藿黃酮(phosphated Epimedium flavones,pEF),探究EF、pEF在體外鴨胚肝細胞(duck embryonic hepatocytes,DEHs)上抗 1 型鴨肝炎病毒(Duck hepatitis virus 1,DHV-1)活性、體外抗病毒機制、淋巴細胞增殖和體內(nèi)增強免疫功能、抗氧化能力的效果并通過干預(yù)實驗再次驗證,旨在研究一種新型抗病毒藥物。本試驗分為以下五個部分:試驗Ⅰ淫羊藿總黃酮的磷酸化分子修飾及結(jié)構(gòu)鑒定本試驗旨在研究淫羊藿總黃酮磷酸化修飾的修飾條件及磷酸化修飾物的結(jié)構(gòu)鑒定。首先采用三聚磷酸鈉-三偏磷酸鈉作為磷酸化試劑,按照L9(34)水平設(shè)計正交試驗篩選最優(yōu)修飾條件;然后采用FT-IR、HRESIMS、NMR對修飾后的磷酸化產(chǎn)物進行結(jié)構(gòu)鑒定。試驗結(jié)果表明,制備磷酸化淫羊藿總黃酮的最佳磷酸化條件為反應(yīng)溫度70℃、反應(yīng)時間6 h、反應(yīng)pH=9。經(jīng)過FT-IR、HRESIMS、NMR比較修飾前與修飾后的結(jié)構(gòu),我們得出了磷酸化修飾7后淫羊藿苷的分子式為 6"'-磷酸化淫羊藿苷(8-prenylkaempferol-4'-methylether-3-rhamnosyl-7-(6"'-phosphate)-glycoside)。試驗Ⅱ淫羊藿總黃酮及其磷酸化修飾產(chǎn)物體外抗鴨肝炎病毒研究本試驗旨在研究淫羊藿總黃酮(EF)及磷酸化淫羊藿總黃酮(pEF)在體外抗鴨肝炎病毒(DHV-1)效果。比較了兩者抗DHV-1感染鴨胚肝細胞(DEHs)的活性,并采用直接免疫熒光法和real-time PCR法比較兩者對病毒吸附、復(fù)制、釋放的影響。試驗結(jié)果顯示,EF與pEF均能顯著提高侵染病毒后的DEHs細胞活性,pEF效果優(yōu)于EF。兩者均能抑制病毒復(fù)制及釋放,pEF對病毒復(fù)制環(huán)節(jié)的抑制明顯優(yōu)于EF,二者對病毒吸附細胞有一定抑制作用,但二者間無顯著差異。試驗Ⅲ淫羊藿總黃酮及其磷酸化修飾產(chǎn)物治療鴨病毒性肝炎及抗氧化損傷作用研究本試驗研究了 EF和pEF對DVH的治療作用和抗氧化損傷作用。180羽j夜妊妓婊，

本文編號：1882275