本文選題：雞γ-干擾素 + 分泌表達(dá)��； 參考：《中國家禽》2017年01期

【摘要】：將克隆的雞γ-干擾素(Ch IFNγ)基因亞克隆至酵母表達(dá)載體p PICZα-A中,構(gòu)建重組質(zhì)粒p PIC-Ch IFNγ。將鑒定正確的質(zhì)粒p PIC-Ch IFNγ線性化,通過電轉(zhuǎn)化整合到畢赤酵母菌株X-33基因組中,得到陽性菌株。經(jīng)1%甲醇連續(xù)誘導(dǎo)4 d,表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)SDS-PAGE檢測,結(jié)果表明Ch IFNγ在酵母中獲得了分泌型表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物分子量約為20 ku。表達(dá)產(chǎn)物粗提后以細(xì)胞病變抑制法檢測其活性,效價為107.69U/m L;在雞胚中能有效抑制H9N2亞型禽流感病毒的增殖;動物攻毒保護(hù)試驗結(jié)果顯示,表達(dá)的蛋白具有較好的抗病毒活性。
[Abstract]:The cloned chicken interferon 緯 Ch IFN 緯 gene was subcloned into yeast expression vector p PICZ 偽 -A and the recombinant plasmid p PIC-Ch IFN 緯 was constructed. The identified plasmid p PIC-Ch IFN 緯 was linearized and integrated into the genome of Pichia pastoris X-33 by electrical transformation. The positive strain was obtained. After being induced by 1% methanol for 4 days, the expression product was detected by SDS-PAGE. The results showed that Ch IFN 緯 was secreted in yeast, and the molecular weight of the product was about 20 ku. The activity of the expressed product was detected by cytopathic inhibition assay, the titer was 107.69U/m L, the proliferation of H9N2 subtype avian influenza virus was effectively inhibited in chicken embryo, and the results of animal antivirus protection test showed that the expressed protein had good antiviral activity.
【作者單位】： 青島易邦生物工程有限公司;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所;
【分類號】：S859.797

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本文編號：1880217