利用核苷類(lèi)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑去除疫苗毒種中禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒污染
本文選題:禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒 + azidothymidine; 參考:《中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年06期
【摘要】:使用污染有禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒(REV)的弱毒疫苗被認(rèn)為是REV流行的原因之一,去除疫苗毒種中REV污染是生產(chǎn)合格疫苗的基礎(chǔ)環(huán)節(jié),本研究試圖利用核苷類(lèi)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑類(lèi)藥物Azidothymidine(LAM)和Lamivudine(AZT)去除疫苗毒種中REV污染。首先通過(guò)在培養(yǎng)液中添加不同質(zhì)量濃度AZT或LAM連續(xù)傳代以及利用CCK-8測(cè)定細(xì)胞活性的方法,證實(shí)了在培養(yǎng)液中添加不超過(guò)5mg/L的抑制劑類(lèi)藥物對(duì)于DF-1細(xì)胞復(fù)制和活性沒(méi)有影響。體外試驗(yàn)證實(shí),當(dāng)在培養(yǎng)液中分別添加5mg/L的AZT或LAM以及兩者聯(lián)合應(yīng)用時(shí)均可以顯著抑制REV在DF-1細(xì)胞上的復(fù)制,通過(guò)在新城疫弱毒疫苗中人為添加REV模擬AZT或LAM以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)疫苗毒種中REV污染的凈化作用,結(jié)果顯示經(jīng)藥物干預(yù)4代后即將REV去除,并且凈化后毒種檢驗(yàn)合格。本研究證實(shí)了AZT或LAM在體外對(duì)REV的抑制作用,并在人工模擬試驗(yàn)中成功凈化了疫苗毒種中污染的REV。
[Abstract]:The use of attenuated vaccine contaminated with avian reticuloendotheliosis virus (revv) is considered to be one of the reasons for the prevalence of REV. The removal of REV contamination from vaccine strains is the basic link in the production of qualified vaccines. The aim of this study was to remove REV contamination from vaccine strains by using nucleoside reverse transcriptase inhibitors Azidothymidine lam and Lamivudine AZT. Firstly, by adding different concentrations of AZT or LAM to the culture medium for continuous passage and using CCK-8 to determine the cell activity, it was proved that the addition of no more than 5mg/L inhibitor to the culture medium had no effect on the replication and activity of DF-1 cells. In vitro experiments showed that AZT or LAM of 5mg/L and their combination could significantly inhibit the replication of REV in DF-1 cells. By artificially adding REV to attenuated Newcastle disease vaccine, AZT or LAM were added to the vaccine, and the combined use of the two methods was used to purify the REV contamination in the vaccine. The results showed that REV would be removed after 4 generations of drug intervention, and the purified virus could be tested. This study confirmed the inhibitory effect of AZT or LAM on REV in vitro, and successfully purified the contaminated revs from vaccine strains in artificial simulation test.
【作者單位】: 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31402226)
【分類(lèi)號(hào)】:S852.65
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
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