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Leachii支原體PCR檢測方法的建立與應(yīng)用

發(fā)布時間:2018-05-11 13:41

  本文選題:leachii支原體 + PCR。 參考:《中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報》2017年11期


【摘要】:為建立一種leachii支原體的檢測方法,本研究根據(jù)leachii支原體LPPA外膜蛋白編碼基因序列設(shè)計一對引物,建立了PCR檢測方法。結(jié)果顯示,該方法僅對leachii支原體擴增出539 bp的目的片段,而與牛支原體、絲狀支原體山羊亞種、綿羊肺炎支原體、絲狀支原體絲狀亞種小菌落型、山羊支原體山羊肺炎亞種等其它支原體無交叉反應(yīng),具有良好的特異性;該方法對leachii支原體的最低檢測濃度為105 ccu/m L,敏感性較高。采用該方法可以在乳汁和關(guān)節(jié)液等病料樣品中檢測到leachii支原體,與分離培養(yǎng)的結(jié)果相符。上述結(jié)果表明,本研究建立的leachii支原體PCR檢測方法具有特異性強、敏感性高的特點,可實現(xiàn)準(zhǔn)確、高效檢測leachii支原體的目的。
[Abstract]:In order to establish a method for detection of Mycoplasma leachii, a pair of primers was designed based on the sequence of LPPA outer membrane protein encoding gene of Mycoplasma leachii, and a method of PCR detection was established. The results showed that the method only amplified 539 BP target fragments for Mycoplasma leachii, but with bovine mycoplasma, Mycoplasma filamentum subspecies, Mycoplasma sheeppneumoniae. The Mycoplasma filamentous subspecies of Mycoplasma filamentous subspecies, the Mycoplasma goat pneumonia subspecies and other Mycoplasma have no cross reaction and have good specificity. The minimum detection concentration of Mycoplasma leachii is 105 ccu/m L, and the sensitivity is high. This method can be used to detect Mycoplasma leachii in the samples of milk and joint fluid. The results showed that the PCR detection method of Mycoplasma leachii established in this study has the characteristics of high specificity and high sensitivity, which can be used for accurate and efficient detection of leachii mycoplasma.

【作者單位】: 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動物科技學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所獸醫(yī)生物技術(shù)國家重點實驗室/牛羊傳染病研究創(chuàng)新團隊;
【基金】:黑龍江省自然科學(xué)基金面上項目(C201348) 獸醫(yī)生物技術(shù)國家重點實驗室開放課題基金(sklvbf201604)
【分類號】:S852.62

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本文編號:1874195

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