本文選題：芳樟醇 + 細胞因子　； 參考：《吉林大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：多殺性巴氏桿菌肺炎是在獸醫(yī)臨床實踐中極為常見的一種疾病，并會導(dǎo)致非常高的發(fā)病率和死亡率。為解決這一全球性難題，過去數(shù)年中一些新發(fā)現(xiàn)的抗生素被陸續(xù)投入到臨床使用，但是細菌性肺炎的致死率并沒有降低。對此一個重要的原因就是病原菌引發(fā)的炎癥反應(yīng)會失去控制以致急性肺損傷或急性呼吸窘迫癥的發(fā)生。雖然炎癥是機體對抗病原菌刺激時的保護防御反應(yīng)，但是大量的白細胞與肺組織固有細胞激活會導(dǎo)致嚴重的肺組織損傷，甚至導(dǎo)致多器官功能衰竭，對人類和動物的生命健康都造成了極大地危害。目前傳統(tǒng)的化學(xué)合成藥物毒副作用大、不能長期連續(xù)使用而且細菌耐藥性也在不斷增加。因此，急需尋找和開發(fā)療效好并且副作用小的抗炎藥物。而中藥有著來源廣、毒性小和作用范圍廣等優(yōu)點，將其開發(fā)應(yīng)用到醫(yī)學(xué)臨床已經(jīng)成為當(dāng)今熱點課題。 芳樟醇，幾乎存在于所有的天然植物香料中，屬于鏈狀萜烯醇類物質(zhì)。已有研究表明芳樟醇能夠抑制脂多糖引起的急性肺損傷，但是關(guān)于其對多殺性巴氏桿菌肺炎作用的相關(guān)報道較少。 本實驗從體外和體內(nèi)兩個方面研究芳樟醇通過調(diào)節(jié)Nrf-2信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路從而在一定程度上抑制多殺性巴氏桿菌引起的肺炎。首先，將不同濃度的芳樟醇加入到人肺腺癌上皮細胞（A549細胞）中，Western Blot檢測不同濃度的芳樟醇是否能夠激活Nrf-2信號通路；并借助凝膠遷移或電泳遷移率實驗（EMSA)進一步驗證上述結(jié)果。然后，我們應(yīng)用RNA干擾技術(shù)敲降Nrf-2的表達，研究Nrf-2是否參與到多殺性巴氏桿菌引起的炎癥反應(yīng)中。在此基礎(chǔ)上，構(gòu)建多殺性巴氏桿菌誘發(fā)的革蘭氏陰性菌肺炎模型，檢測不同濃度的芳樟醇對肺炎小鼠的治療效果；并收集肺組織以檢測濕重干重（W/D）比率、髓過氧化物酶（MPO）活性、超氧化物歧化酶（SOD)活性、活性氧（ROS）含量、炎性細胞因子濃度和觀察病理組織學(xué)的變化。 體外實驗結(jié)果表明，芳樟醇能夠增加細胞核中Nrf-2的含量，促進抗氧化因子血紅素加氧酶-1（HO-1）的分泌，，并呈濃度依賴性增強；多殺性巴氏桿菌感染A549細胞后，促炎性細胞因子TNF-a和IL-6分泌量顯著增加，而芳樟醇能夠較明顯的抑制它們的分泌量，但這種抑制效果在Nrf-2敲降的細胞中極顯著的下降，這表明在多殺性巴氏桿菌誘發(fā)的炎癥中，Nrf-2是一個重要的調(diào)控因子，并且芳樟醇的治療作用也依賴于對Nrf-2的作用。體內(nèi)實驗結(jié)果顯示，在多殺性巴氏桿菌誘發(fā)的革蘭氏陰性菌肺炎模型中，芳樟醇能夠減少小鼠的死亡率，治療效果呈濃度依賴性增強；并且能夠顯著降低小鼠肺組織中的MPO和ROS的活性以及小鼠肺臟的濕重干重比率，抑制TNF-a和IL-6的分泌，增加SOD的活性，病理切片表明芳樟醇明顯地減弱了多殺性巴氏桿菌導(dǎo)致的肺損傷。綜上所述，芳樟醇可以通過其抗氧化活性發(fā)揮抗炎作用，并有可能作為一種新的抗炎藥物來治療與炎癥相關(guān)的疾病。
[Abstract]:Many new antibiotics have been put into clinical use in the past few years , but the death rate of bacterial pneumonia has not been reduced .

Lincamphol , which is almost present in all natural plant spice , belongs to a chain - like terpene alcohol substance , and has been found to be capable of inhibiting acute lung injury caused by lipopolysaccharide . However , there are few related reports about its effect on multi - kill pasteurellosis .

In vitro and in vivo two aspects were studied in vitro and in vivo by regulating the pathway of Nrf - 2 signal transduction pathway to some extent to inhibit the pneumonia caused by multocida . First , the different concentrations of linalyl alcohol were added to human lung adenocarcinoma epithelial cells ( A549 cells ) , and the Western Blot was used to detect whether linalyl alcohol in different concentrations could activate the Nrf - 2 signal pathway .
The results were further verified by means of gel migration or electrophoretic mobility experiment ( EMSA ) . Then , we used RNA interference technique to knock down Nrf - 2 expression and investigate whether Nrf - 2 was involved in the inflammatory reaction caused by Pasteurellosis .
The lung tissue was collected to detect the ratio of wet weight dry weight ( W / D ) , myeloperoxidase ( MPO ) activity , superoxide dismutase ( SOD ) activity , reactive oxygen ( ROS ) content , inflammatory cytokine concentration and observed pathological histology .

In vitro experiment , the content of Nrf - 2 in the nucleus was increased , the secretion of heme oxygenase - 1 ( HO - 1 ) was promoted and the concentration - dependent enhancement was promoted .
The results showed that Nrf - 2 was an important regulator in the treatment of Gram - negative bacteria - induced inflammation .
and the activity of TNF - a and IL - 6 can be remarkably reduced , the secretion of TNF - a and IL - 6 is inhibited , the activity of SOD is increased , and the pathological section shows that the linalyl alcohol obviously reduces the lung injury caused by the multocida . Therefore , the linalyl alcohol can exert anti - inflammatory effect through the antioxidant activity of the mouse , and can be used as a new anti - inflammatory drug for treating diseases related to inflammation .

【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S859.7

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 唐先春,吳斌,索緒峰,王大林,陳煥春,尹爭艷;豬多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報;2005年06期

2 楊發(fā)龍;張煥容;夏夢蕓;于學(xué)輝;湯承;岳華;;禽A型多殺性巴氏桿菌的分離和鑒定[J];四川畜牧獸醫(yī);2008年05期

3 譚雙;余旭平;黃賢波;;多殺性巴氏桿菌基因組分泌蛋白的預(yù)測分析[J];湖北農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年11期

4 高明燕;徐步;趙寶華;范建華;龔建森;劉學(xué)賢;;多殺性巴氏桿菌檢測、鑒定和分型研究進展[J];動物醫(yī)學(xué)進展;2010年01期

5 謝波;朱必鳳;楊旭夫;;多殺性巴氏桿菌抗原的研究進展[J];韶關(guān)學(xué)院學(xué)報;2010年03期

6 王彩麗;榮俊;王化俊;匡紅艷;熊團林;汪常;;雞多殺性巴氏桿菌的鑒定和藥物敏感試驗[J];湖北農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年05期

7 龐安娜;劉燕;韋強;肖琛聞;鮑國連;季權(quán)安;;兔多殺性巴氏桿菌16S rRNA PCR檢測方法的建立和應(yīng)用[J];中國養(yǎng)兔;2011年08期

8 王曉麗;畢寧寧;王永明;李士成;;兔多殺性巴氏桿菌培養(yǎng)工藝的研究報告[J];上海畜牧獸醫(yī)通訊;2013年02期

9 康艷紅;;多殺性巴氏桿菌的研究進展[J];中國畜牧獸醫(yī)文摘;2013年06期

10 桂文龍;胡新崗;管遠紅;唐露露;陳鳳;;21株豬源多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及藥敏試驗[J];江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年09期

相關(guān)會議論文 前10條

1 羅瓊;李力施;林志雄;;從澳大利亞進口病死種羊中分離出多殺性巴氏桿菌[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會成立20周年慶典暨第十次學(xué)術(shù)研討會論文集（下）[C];2003年

2 余旭平;朱軍莉;何世成;王麗輝;牛冬;阮輝;;多殺性巴氏桿菌跨膜蛋白基因片段的克隆與分析[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會成立20周年慶典暨第十次學(xué)術(shù)研討會論文集（下）[C];2003年

3 唐先春;吳斌;索緒峰;王大林;陳煥春;尹爭艷;;豬多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究[A];第一屆中國養(yǎng)豬生產(chǎn)和疾病控制技術(shù)大會——2005中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會學(xué)術(shù)年會論文集[C];2005年

4 李任峰;戴金康;王絹;王三虎;鄭玉姝;劉麗艷;;新鄉(xiāng)地區(qū)兔巴氏桿菌的分離與鑒定[A];第四屆第九次全國學(xué)術(shù)研討會暨飼料和動物源食品安全戰(zhàn)略論壇論文集（下冊）[C];2008年

5 楊寶鳳;鄒靈秀;李能章;黃園媛;吳建云;王自力;魏學(xué)良;彭遠義;;6株牛源多殺性巴氏桿菌A型的分離鑒定及其部分生物學(xué)特性比較分析[A];第四屆全國牛病防制及產(chǎn)業(yè)發(fā)展大會論文集[C];2012年

6 彭遠義;;牛源多殺性巴氏桿菌A型相關(guān)研究[A];第四屆全國牛病防制及產(chǎn)業(yè)發(fā)展大會論文集[C];2012年

7 楊寶鳳;周偉;李能章;胡娟;夏天;徐亞麗;王自力;魏學(xué)良;吳建云;彭遠義;;兩株牛源多殺性巴氏桿菌的分離鑒定[A];中國奶業(yè)協(xié)會第26次繁殖學(xué)術(shù)年會暨國家肉牛牦牛/奶牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系第3屆全國牛病防治學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2011年

8 龍青山;李能章;鄒靈秀;黃園媛;楊寶鳳;吳建云;王自力;魏學(xué)良;彭遠義;;6株牛源多殺性巴氏桿菌A型主要毒力基因的比較分析[A];第四屆全國牛病防制及產(chǎn)業(yè)發(fā)展大會論文集[C];2012年

9 李峰;沈志強;吳信明;劉吉山;林初文;;蜂膠對禽源多殺性巴氏桿菌與大腸桿菌的抑菌試驗[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會禽病學(xué)分會第十一次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2002年

10 王紅琳;廖永洪;楊峻;羅玲;羅青平;艾地云;溫國元;張蓉蓉;邵華斌;;湖北地方土雞多殺性巴氏桿菌的分離和PCR鑒定[A];第二屆中國黃羽肉雞行業(yè)發(fā)展大會會刊[C];2010年

相關(guān)重要報紙文章 前1條

1 山西太原神龍應(yīng)用技術(shù)有限公司 李寶麗;豬多殺性巴氏桿菌感染的救治[N];中國畜牧報;2002年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 郭東春;多殺性巴氏桿菌兔體內(nèi)差異表達基因及其突變株構(gòu)建的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

2 湯細彪;豬源多殺性巴氏桿菌的分子流行病學(xué)與致病性研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 馬曉菁;致犢牛肺炎多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及部分生物學(xué)特性研究[D];石河子大學(xué);2010年

2 劉文靜;多殺性巴氏桿菌全基因組測序與比較基因組學(xué)分析[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

3 唐先春;豬多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

4 何傳雨;牛源多殺性巴氏桿菌莢膜和毒力相關(guān)基因的克隆及序列分析[D];石河子大學(xué);2011年

5 鄒靈秀;牛源A型多殺性巴氏桿菌溶血特性分析及滅活疫苗候選菌株篩選[D];西南大學(xué);2013年

6 盧順;多殺性巴氏桿菌毒素單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

7 劉江梅;多殺性巴氏桿菌跨膜蛋白基因的選擇克隆[D];浙江大學(xué);2007年

8 徐朋朋;鴨源多殺性巴氏桿菌分離鑒定及感染雛鴨動態(tài)病理學(xué)觀察[D];河南科技大學(xué);2011年

9 梁媛;豬萎縮性鼻炎A型產(chǎn)毒素多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及其單克隆抗體的制備和初步鑒定[D];廣西大學(xué);2007年

10 王瑩;牛多殺性巴氏桿菌誘導(dǎo)家蠅幼蟲抑制性消減文庫的構(gòu)建及部分差異表達基因的分析[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

本文編號：1847268