表達(dá)豬圓環(huán)病毒2型ORF2基因的重組腦心肌炎病毒的構(gòu)建與鑒定
本文選題:豬腦心肌炎病毒 + 豬圓環(huán)病毒型。 參考:《病毒學(xué)報》2017年02期
【摘要】:以腦心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)作為病毒載體,尋找基因組里理想的外源基因插入位點(diǎn),為構(gòu)建多價疫苗奠定基礎(chǔ)。豬圓環(huán)病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染可引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征等多種疾病。腦心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)宿主譜廣,能夠天然感染多種哺乳動物。本研究采用EMCV NJ08毒株cDNA感染性克隆,將PCV2ORF2基因插入EMCV L蛋白基因第6位及第7位氨基酸之間,拯救獲得重組EMCV rNJ08/Cap,拯救病毒含有分子遺傳標(biāo)記。Western Blot和IFA結(jié)果顯示,該重組病毒成功表達(dá)Cap蛋白。重組病毒rNJ08/Cap在BHK-21細(xì)胞上生長曲線和病毒蝕斑大小與親本病毒NJ08相似,證明EMCV可以作為表達(dá)外源基因的病毒載體,為PCV2和EMCV疫苗研究奠定了重要基礎(chǔ)。
[Abstract]:Encephalomyocarditis virus (EMCV) was used as the virus vector to search for the ideal foreign gene insertion site in the genome and lay the foundation for the construction of multivalent vaccine. Porcine circovirus type 2 (PCV2) infection may cause multiple system failure syndrome in weaned piglets. Encephalitis virus Encephalomytis virusus (EMCV) has a wide host spectrum and can infect many mammals naturally. In this study, the cDNA infectious clone of EMCV NJ08 strain was used to insert PCV2ORF2 gene into the amino acids of EMCV L protein gene, and the recombinant EMCV rNJ08 / Cap. was obtained. The results of molecular genetic marker. Western Blot and IFA showed that the recombinant EMCV rNJ08 / Cap. The recombinant virus successfully expressed Cap protein. The growth curve of recombinant virus rNJ08/Cap on BHK-21 cells and the size of virus plaque were similar to those of parent virus NJ08, which indicated that EMCV could be used as a viral vector expressing exogenous gene, which laid an important foundation for the study of PCV2 and EMCV vaccines.
【作者單位】: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部動物細(xì)菌學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(項(xiàng)目號:31502082),題目:腦心肌炎病毒L蛋白影響I型干擾素信號通路的探索 中央高;究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金(項(xiàng)目號:KJQN201616) 國家生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項(xiàng)(項(xiàng)目號:CARS-36)
【分類號】:S852.65
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,本文編號:1825825
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