本文選題：大腸桿菌 + 腹瀉��； 參考：《吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：大腸桿菌性腹瀉在豬養(yǎng)殖業(yè)中是一種常見的疾病,造成了豬養(yǎng)殖業(yè)的巨大經(jīng)濟(jì)損失。而在大腸桿菌性腹瀉當(dāng)中,由ETEC引起的腹瀉尤為常見,特別是在仔豬斷奶時(shí)期,體內(nèi)體外各種因素都發(fā)生變化的時(shí)候也是腹瀉易發(fā)、多發(fā)的時(shí)機(jī)。pSIP-409-FaeG-DC重組乳酸菌是由課題組前期制備并保存。該重組菌是將K88菌毛上的FaeG基因融合DCpep,再連接pSIP-409載體導(dǎo)入乳酸菌中進(jìn)行表達(dá),已經(jīng)在小鼠身上證實(shí)了免疫效果。本研究在此基礎(chǔ)之上,利用已經(jīng)合成好的基因工程重組乳酸菌pSIP-409-FaeG-DC運(yùn)用到仔豬臨床,研究重組乳酸菌對(duì)仔豬腹瀉的免疫保護(hù)作用,評(píng)價(jià)此乳酸菌在將來用于疫苗生產(chǎn)的可能性。具體研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:先是確定最佳攻毒劑量。將12頭仔豬隨機(jī)分成3組,每組4頭,分別灌服不同濃度的大腸桿菌菌液來誘導(dǎo)仔豬腹瀉,具體將濃度設(shè)定為6×107CFU/mL、6×108CFU/mL、6×109CFU/mL,觀察各組仔豬的腹瀉程度,計(jì)算腹瀉率,仔豬腹瀉的程度通過糞便計(jì)分來反映,結(jié)果表明,6×109CFU/mL為最佳攻毒劑量。在確定好最佳攻毒劑量之后進(jìn)行了重組乳酸菌的免疫保護(hù)效果研究。選擇40頭(28±2)日齡的杜×長(zhǎng)×大斷奶公豬,平均體重為(8.06±0.31)kg,隨機(jī)分成A、B、C、D組,每組10頭。第一周進(jìn)行免疫,A組每天口服MRS培養(yǎng)基,B、C兩組口服乳酸菌制劑(每日攝入量為5×108 CFU),均采用水拌料的形式,將試劑加入飲水中與飼料充分混合后飼喂仔豬,D組不做任何處理;第二周ETEC攻毒,A、B兩組灌服6×109CFU/mL大腸桿菌5mL,C組灌服生理鹽水5mL,D組不做處理。兩周后全部屠宰。試驗(yàn)期間測(cè)定體重的變化、料重比來反映生長(zhǎng)性能,觀察并統(tǒng)計(jì)糞便計(jì)分以及血常規(guī),測(cè)定重組乳酸菌對(duì)腹瀉的緩解作用。此外,屠宰后進(jìn)行了腸道內(nèi)容物檢測(cè)、制作了病理切片、將腸絨毛放置在掃描電鏡下,從微觀層面進(jìn)行了觀察分析,并進(jìn)行了MTT淋巴轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)測(cè)其對(duì)免疫的影響。試驗(yàn)結(jié)果顯示,A組體重明顯下降,B組體重也有一定下降,C組與D組體重正常增長(zhǎng),差異性不顯著(P㧐0.05),體重變化結(jié)果說明乳酸菌起到了良好的保護(hù)作用,有效緩解了仔豬腹瀉;A組的料重比高于B組,說明B組仔豬的生產(chǎn)性能高于A組,但差異性不顯著(P㧐0.05),料重比和抗腹瀉能力指數(shù)表明乳酸菌制劑在一定程度上能緩解仔豬的腹瀉癥狀,但在提高生產(chǎn)性能上的作用不是特別顯著;從腸道內(nèi)容物監(jiān)測(cè)結(jié)果來看,A組的大腸桿菌數(shù)量與B組差異極顯著(P㩳0.01),A組明顯多于B組,A、B兩組的非厭氧菌與B、C兩組差異極顯著(P㩳0.01),A、B兩組數(shù)量明顯多于C、D兩組,檢測(cè)表明,該重組乳酸菌能減少腸道大腸桿菌的數(shù)量,提高益生菌的數(shù)量;從病理切片可得知,重組乳酸菌對(duì)腸道有良好的保護(hù)效果;從腸絨毛掃描電鏡圖可看出,該重組乳酸菌在微觀層面也起到了良好的保護(hù)作用,能夠保護(hù)絨毛免受ETEC的侵害;根據(jù)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)結(jié)果,B組仔豬外周血中淋巴細(xì)胞增殖能力和A組相比差異極顯著(P㩳0.01),從整體效應(yīng)上證明了該微生態(tài)制劑能提高機(jī)體的整體免疫力。綜上,該重組乳酸菌能提高仔豬的生長(zhǎng)性能,減緩腹瀉癥狀,保護(hù)腸絨毛,提高機(jī)體的免疫力,是一種效用顯著的微生態(tài)制劑,為ETEC疫苗的研發(fā)打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
[Abstract]:The effect of recombinant lactic acid bacteria on diarrhea of piglets was studied by using recombinant lactic acid bacteria pSIP - 409 - FaeG - DC . The results showed that the number of E . coli in group A was significantly higher than that in group A , but the difference was not significant ( P ? 0.05 ) .

【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S858.28

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 董曉麗;張乃鋒;周盟;屠焰;刁其玉;;復(fù)合菌制劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、糞便微生物和血清指標(biāo)的影響[J];動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào);2013年06期

2 彭曉培;李長(zhǎng)軍;李t，

本文編號(hào)：1799058