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駱駝斯氏副柔線蟲病流行病學(xué)調(diào)查及生前PCR診斷方法建立

發(fā)布時(shí)間:2018-04-24 03:30

  本文選題:駱駝斯氏副柔線蟲病 + 流行病學(xué)調(diào)查。 參考:《內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文


【摘要】:斯氏副柔線蟲病是嚴(yán)重危害駱駝養(yǎng)殖業(yè)的一種寄生蟲病。為了解近幾年內(nèi)蒙古地區(qū)駱駝斯氏副柔線蟲病的流行情況,建立一種駱駝斯氏副柔線蟲病的生前診斷方法。本試驗(yàn)于2013-2015年每年冬季,對(duì)內(nèi)蒙古地區(qū)駱駝主產(chǎn)地的駱駝斯氏副柔線蟲病流行情況進(jìn)行了調(diào)查。利用斯氏副柔線蟲rDNA ITS基因高度特異區(qū)域設(shè)計(jì)斯氏副柔線蟲特異性引物,通過7種駱駝常見的消化道線蟲及斯氏副柔線蟲蟲卵,對(duì)所設(shè)計(jì)引物的特異性、敏感性進(jìn)行了驗(yàn)證,并采用3種方法對(duì)人工模擬陽性駱駝糞便中斯氏副柔線蟲蟲卵DNA進(jìn)行了提取,以研究駱駝斯氏副柔線蟲病生前診斷方法。結(jié)果顯示,內(nèi)蒙古地區(qū)四個(gè)駱駝主產(chǎn)地的108峰駱駝斯氏副柔線蟲平均感染率為81.3%,最高感染強(qiáng)度為1272條/峰,雌雄蟲比例為1.7:1-2.4:1,被調(diào)查的駱駝中巴彥淖爾市感染率為100%,烏蘭察布市為85%,阿拉善盟為70.9%,錫林郭勒盟為57.1%。試驗(yàn)所設(shè)計(jì)的引物特異性強(qiáng)、敏感性高,目的片段為551bp,可檢出15枚斯氏副柔線蟲蟲卵。改良CTAB+SiO2吸附法提取人工模擬陽性駱駝糞便中斯氏副柔線蟲蟲卵DNA,蟲卵檢出率為80%,優(yōu)于試劑盒提取法及傳統(tǒng)飽和酚-氯仿抽提法。本試驗(yàn)結(jié)果表明,近年來內(nèi)蒙古地區(qū)駱駝斯氏副柔線蟲病流行依然普遍,所設(shè)計(jì)的斯氏副柔線蟲特異性引物及篩選出的DNA提取方法可用于駱駝斯氏副柔線蟲病陽性糞便檢測,為駱駝斯氏副柔線蟲病生前診斷及流行病學(xué)調(diào)查奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Nematode nematode disease is a parasitic disease that seriously endangers camel farming. In order to understand the prevalence of nematode in camel in Inner Mongolia in recent years, an antemortem diagnostic method was established. In the winter of 2013-2015, a survey was conducted on the prevalence of nematode nematodes in the main producing areas of camels in Inner Mongolia. Using the highly specific region of rDNA ITS gene, the specific primers were designed. The specificity and sensitivity of the primers were verified by seven common alimentary canal nematodes and eggs of Camel. Three methods were used to extract the DNA from the feces of artificially simulated positive camels, and to study the methods of diagnosis of nematodes spp. The results showed that the average infection rate was 81.3 and the highest infection intensity was 1272 per peak. The infection rate of the camels investigated was 100 in Bayannur, 85in in Ulaanchab, 70.9 in Alashan and 57.1 in Xilingol. The primers designed were highly specific and sensitive, and the target fragment was 551bp.The 15 eggs of nematode skrjabini could be detected. The modified CTAB SiO2 adsorption method was used to extract the egg DNA from simulated positive camel feces. The detection rate of egg was 80%, which was superior to the extraction method of kit and traditional saturated phenol-chloroform extraction method. The results showed that the prevalence of nematode spp. In recent years was still widespread in Inner Mongolia. The designed primers and the DNA extraction method could be used to detect the feces of the positive cases of nematode camels. The results laid a foundation for the antemortem diagnosis and epidemiological investigation of Camel's nematode parasiliasis.
【學(xué)位授予單位】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S858.24

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1794971

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