本文選題：PK-細(xì)胞 + 微載體�。� 參考：《西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)》2017年02期

【摘要】：為建立在生物反應(yīng)器內(nèi)微載體逐級(jí)放大培養(yǎng)PK-15細(xì)胞和增殖PCV2技術(shù)。采用分批式培養(yǎng)方法,研究了PK-15細(xì)胞在微載體胰酶消化放大懸浮培養(yǎng)及豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)增殖工藝。結(jié)果表明,5 g/L的微載體和高糖DMEM下,采用4.0×105cells/m L的初始接種密度及培養(yǎng)至第2天進(jìn)行換液操作工藝可以獲得最佳的PK-15細(xì)胞生長(zhǎng)效能。胰酶消化轉(zhuǎn)移將PK-15細(xì)胞從1 L反應(yīng)器放大至3 L反應(yīng)器,微載體上細(xì)胞貼附均勻、生長(zhǎng)旺盛,培養(yǎng)3 d細(xì)胞密度可達(dá)34.3×105cells/m L。采用感染復(fù)數(shù)為0.1的接毒比例,細(xì)胞接毒后在微載體上傳至第3代收獲毒液可獲得最高的PCV2增殖效價(jià)107.25TCID50/m L。為PCV2疫苗的生物反應(yīng)器規(guī)模化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to establish the technique of PK-15 cell culture and PCV2 proliferation in bioreactor, the microcarriers were amplified step by step. Batch culture method was used to study the process of PK-15 cell proliferation in microcarrier trypsin digestion and suspension culture and porcine circovirus type 2 (Porcine circovirus 2) proliferation. The results showed that under 5 g / L microcarrier and high glucose DMEM, the optimal growth efficiency of PK-15 cells could be obtained by using the initial inoculation density of 4.0 脳 105cells/m L and the operation of changing solution to the second day. The PK-15 cells were amplified from 1 L reactor to 3 L reactor by trypsin digestion and metastasis. The cells on the microcarriers were uniformly attached and grew vigorously. The cell density reached 34.3 脳 105cells/m / L after 3 days of culture. The highest PCV2 proliferation titer (107.25TCID50/m L) was obtained by inoculating the cells with the infected complex number of 0.1, and then uploading it to the third generation harvest venom after inoculating with the microcarrier. It lays a foundation for the bioreactor production of PCV2 vaccine.
【作者單位】： 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院國(guó)家獸用生物制品工程技術(shù)研究中心農(nóng)業(yè)部獸用生物制品工程技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;江蘇省動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：江蘇省農(nóng)業(yè)自主創(chuàng)新項(xiàng)目[CX(14)5044] 農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目(201303046) 江蘇省農(nóng)業(yè)支撐計(jì)劃(BE2012370)
【分類號(hào)】：S852.651

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1777187