雞球蟲(chóng)病四價(jià)五株活疫苗實(shí)驗(yàn)室效力和安全性研究
本文選題:雞球蟲(chóng)病四價(jià)五株活疫苗 + 早熟弱毒株; 參考:《山西農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年碩士論文
【摘要】:為探索雞球蟲(chóng)病四價(jià)五株活疫苗的免疫保護(hù)效果和安全性,為臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù),根據(jù)《獸用生物制品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)匯編》(2009版)和中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部第683公告《獸用生物制品試驗(yàn)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》中對(duì)疫苗的質(zhì)量控制要求,使用適宜日齡的SPF雛雞,以血便記分、死亡率、相對(duì)增重率(RWG)、腸道(十二指腸、空腸和盲腸)病變記分和病變記分減少率(RLS)為主要檢測(cè)指標(biāo),分別進(jìn)行檢驗(yàn)用混合強(qiáng)毒株毒力測(cè)定、疫苗組方試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)室效力測(cè)定、實(shí)驗(yàn)室安全性和穩(wěn)定性試驗(yàn)等基礎(chǔ)性研究。結(jié)果表明:1.對(duì)33日齡SPF雛雞攻擊混合強(qiáng)毒株。結(jié)果表明,當(dāng)E.tenella (Tsx)、E.necatrix (Nsx)、 E.acervulina (Asx)及E.maxima (Msd和Msx)的接種劑量分別4.00×104、11.00×104、20.00×104、15.00×104和15.00×104個(gè)/只時(shí),攻毒組至少有9只雞各腸道病變記分均≥3.00,死亡率≥40.00%;空白對(duì)照組死亡率和腸道病變記分均為0.00,符合雞球蟲(chóng)疫苗檢驗(yàn)用混合強(qiáng)毒標(biāo)準(zhǔn),將此劑量確定為雞球蟲(chóng)病四價(jià)五株活疫苗檢驗(yàn)用混合強(qiáng)毒接種劑量。2.于4和14日齡對(duì)SPF雛雞進(jìn)行兩次免疫,二免后14d攻毒。結(jié)果表明,隨免疫劑量升高,免疫攻毒組雞只RWG和RLS上升,腸道平均病變記分降低。當(dāng)E.tenella (PTsx)、E.necatrix (PNsx)、E.acervulina (PAsx)和E.maxima (PMsd/PMsx)的一免/二免劑量分別≥1000.00/2000.00、200.00/400.00、400.00/800.00和100.00/200.00個(gè)/只時(shí),免疫攻毒組至少8只雞各腸道病變記分均≤1.00,死亡率≤10.00%,獲得了良好免疫效果。因此,PTsx、PNsx、PAsx和PMsx/PMsd的最小一免/二免劑量為1000.00/2000.00、200.00/400.00、400.00/800.00和100.00/200.00個(gè)/只,推薦一免/二免劑量為1500.00/3000.00、300.00/600.00、600.00/1200.00和150.00/300.00個(gè)/只。3.使用推薦免疫劑量分別對(duì)不同日齡(2d、3d、4d和5d) SPF雛雞進(jìn)行一免,10d后二免,二免后14d攻毒。結(jié)果發(fā)現(xiàn),隨首免日齡的增大,免疫攻毒雞的RWG和RLS升高且死亡率和腸道平均病變記分降低。首免日齡大于等于4日齡的免疫攻毒組至少8只雞各腸病變記分均≤1.00,未發(fā)生死亡,RLS均≥75.00%,獲得了良好免疫效果。因此,4日齡為最小首免日齡。4.使用推薦免疫劑量對(duì)4日齡SPF雛雞進(jìn)行一免,然后分別間隔不同時(shí)間(7d、8d、9d和10d)進(jìn)行二免,二免后14d攻毒。結(jié)果發(fā)現(xiàn),隨二免間隔期的延長(zhǎng),免疫組的RWG和RLS升高,死亡率和腸道平均病變記分降低。間隔9d以上二免攻毒組至少8只雞各腸道病變記分均≤1.00,死亡率≤10.00%,RWG≥75.00%,RLS≥75.00%,獲得了良好免疫效果。因此,最小二免間隔期為9d。5.于4和14日齡以推薦免疫劑量對(duì)SPF雛雞進(jìn)行兩次免疫,二免后間隔不同時(shí)間(6d、10d、14d、39d、60d和91d)攻毒。結(jié)果顯示,各免疫攻毒組的死亡率均≤10.00%,且二免后第10天攻毒組至少8只雞各腸道病變記分均≤1.00,RWG和RLS均≥75.00%,產(chǎn)生了良好免疫力;隨飼養(yǎng)周期的延長(zhǎng)免疫力先上升后降低,二免后91d攻毒組至少8只雞各腸道病變記分均≤1.00,死亡率≤10.00%,此時(shí)仍可達(dá)到良好免疫效果。結(jié)果表明,該疫苗免疫產(chǎn)生期為二免后的第10天,免疫力至少可持續(xù)至二免后第91天(即105日齡)。6.使用推薦免疫劑量于4和14日齡分別對(duì)網(wǎng)上平養(yǎng)和地面平養(yǎng)的SPF雛雞進(jìn)行兩次免疫,二免后14d攻毒。結(jié)果顯示,免疫期間兩組RWG均≥80.00%,組間平均增重差異不顯著(P0.05),但均顯著低于空白對(duì)照組(P0.05);攻毒后,兩組至少8只雞各腸道病變記分均≤1.00,RLS_75.00%,且均未發(fā)生死亡,說(shuō)明均獲得良好免疫效果。表明地面平養(yǎng)與網(wǎng)上平養(yǎng)雞群對(duì)該球蟲(chóng)疫苗免疫期間的生長(zhǎng)性能(增重)影響無(wú)明顯差異;網(wǎng)上平養(yǎng)和地面平養(yǎng)對(duì)疫苗的免疫效力沒(méi)有顯著影響,僅是地面平養(yǎng)組免疫效力優(yōu)于網(wǎng)上平養(yǎng)組。7.使用推薦免疫劑量對(duì)SPF雛雞分別進(jìn)行一次單劑量、單劑量重復(fù)和一次超劑量(10倍、20倍、30倍和100倍推薦免疫劑量)接種試驗(yàn)。結(jié)果顯示,除100倍劑量接種組大多數(shù)雛雞因重鉻酸鉀中毒死亡率≥80.00%外,其余組均未死亡,各組至少8只雞各腸道病變記分均≤1.00;雛雞的平均增重與空白對(duì)照組無(wú)顯著差異(P0.05),表明除100倍推薦劑量接種外,10倍、20倍、30倍推薦免疫劑量對(duì)雛雞是安全的。8.分別使用不同的保存期(1、2、3、6和9個(gè)月)的疫苗于4和14日齡對(duì)SPF雛雞進(jìn)行兩次免疫,二免后14d攻毒。結(jié)果顯示,隨疫苗保存期的延長(zhǎng),免疫組雛雞的RWG和RLS逐漸降低,腸道平均病變記分逐漸升高,死亡率雖升高但均≤10.00%;各免疫攻毒組至少有8只雞各腸道病變記分均≤1.00,死亡率均≤10.00%,免疫效果良好。表明在避光、2-8。C和2.5%的重鉻酸鉀溶液等保存條件下,該疫苗的保存期至少為9個(gè)月。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:S858.31
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,本文編號(hào):1770867
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