本文選題：鴨疫里默氏桿菌 + AS-基因�。� 參考：《南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)》2017年11期

【摘要】：【目的】了解鴨疫里默氏桿菌AS87-01740基因分子生物學(xué)特性,確定其編碼蛋白抗原性,為鴨疫里默氏桿菌亞單位疫苗研發(fā)提供新的靶標(biāo)抗原選擇�！痉椒ā坎捎肞CR克隆鴨疫里默氏桿菌AS87-01740基因,以DNASTAR和NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)分別進(jìn)行基因生物信息學(xué)分析;利用p Cold-TF原核表達(dá)載體在大腸桿菌BL21感受態(tài)細(xì)胞中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),并分別以SDS-PAGE和Western blotting檢測(cè)融合蛋白的表達(dá)形式及其抗原特異性�！窘Y(jié)果】從鴨疫里默氏桿菌基因組擴(kuò)增獲得的AS87-01740基因編碼框全長(zhǎng)618 bp,編碼205個(gè)氨基酸,理論分子量約21.87 kD,理論等電點(diǎn)(p I)8.2,正電荷氨基酸總數(shù)17個(gè),負(fù)電荷氨基酸總數(shù)16個(gè)。AS87-01740蛋白序列在同種屬分離株中,與2型血清型分離株(11845、YM、GD和CH-2)有很高的相似性(99%),與1型血清型分離株(CH-1和CH-3)的相似性為92%;在不同種屬中,與金黃桿菌(Chryseobacterium sp.)、動(dòng)物潰瘍伯格菌(Bergeyella zoohelcum)和腦膜炎敗血伊麗莎白菌(Elizabethkingia meningosepticum)的相似性分別為61%、60%和57%。經(jīng)異丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)表達(dá)獲得的融合蛋白分子量約77 kD,以可溶性表達(dá)形式為主。Western blotting檢測(cè)結(jié)果表明,融合蛋白能與鴨疫里默氏桿菌陽性血清發(fā)生特異性免疫反應(yīng)。【結(jié)論】AS87-01740基因編碼蛋白在不同鴨疫里默氏桿菌分離株中具有很高的保守性,且能與其陽性血清發(fā)生特異性免疫反應(yīng),是研發(fā)鴨疫里默氏桿菌疫苗的潛在抗原。
[Abstract]:[objective] to understand the molecular biological characteristics of the AS87-01740 gene of Riemer Duck, and to determine the antigenicity of its encoded protein.[methods] PCR was used to clone the AS87-01740 gene of Riemer's disease, and the gene bioinformatics analysis was carried out by DNASTAR and NCBI database.The expression of p Cold-TF was induced in Escherichia coli BL21 receptive cells by using prokaryotic expression vector.The expression and antigen specificity of the fusion protein were detected by SDS-PAGE and Western blotting, respectively. [results] the full length of AS87-01740 gene encoding 205 amino acids was obtained by amplification from the genome of Riemer's disease.The theoretical molecular weight is about 21.87 KD, the theoretical isoelectric point is 8.2, the total number of positively charged amino acids is 17, and the total number of negatively charged amino acids is 16. AS87-01740 protein sequences are in the same species.There was a high similarity with serotype 2 isolates 11845YMN GD and CH-2, and the similarity with serotype 1 isolates CH-1 and CH-3 was 92.In different species,The similarity with Chryseobacterium sp., Bergeyella zoohelcumum and Elizabeth septicum were 61% and 57%, respectively.The molecular weight of the fusion protein induced by isopropylthiothio- 尾 -D galactoside (IPTG) was about 77kD.Western blotting analysis showed that the fusion protein was mainly expressed in soluble form.The fusion protein can react specifically with the positive serum of Riemer pestis. [conclusion] the AS87-01740 gene encoding protein is highly conserved in different isolates of Riemer's disease.It is a potential antigen for the development of Riemer's disease vaccine.
【作者單位】： 廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31272591) 上海市科技興農(nóng)計(jì)劃項(xiàng)目(2016HNG4-1) 中央級(jí)公益性科研院所科研基金項(xiàng)目(2017JB12)
【分類號(hào)】：S852.61

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王永坤,莊國(guó)宏,周繼宏,朱國(guó)強(qiáng),王建業(yè),嚴(yán)維巍;雛鵝感染鴨疫里默氏桿菌的分離與鑒定[J];中國(guó)禽業(yè)導(dǎo)刊;2001年21期

2 呂殿紅;鴨疫里默氏桿菌菌種保存試驗(yàn)及蜂膠苗的保護(hù)試驗(yàn)[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2002年01期

3 何輝,陳文富,林遠(yuǎn)超,陳芳艷,葉榮劍,陳麗萍,李宇禮,王林川;華南地區(qū)鴨疫里默氏桿菌的分離與鑒定[J];養(yǎng)禽與禽病防治;2005年09期

4 何輝,陳芳艷,王林川;廣東鴨疫里默氏桿菌的分離與鑒定[J];廣東畜牧獸醫(yī)科技;2005年02期

5 熊濤;李自力;畢丁仁;;鴨疫里默氏桿菌的分離與鑒定[J];長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版);2006年08期

6 仲崇岳;程安春;汪銘書;朱德康;張淑華;羅啟慧;陳孝躍;;介導(dǎo)鴨疫里默氏桿菌耐β-內(nèi)酰胺類藥物發(fā)生的研究[J];中國(guó)獸醫(yī)科學(xué);2009年12期

7 齊冬梅;袁建豐;覃宗華;吳彩艷;謝明權(quán);;1型鴨疫里默氏桿菌的分離鑒定及基因組文庫(kù)的構(gòu)建[J];中國(guó)獸藥雜志;2014年01期

8 徐榮妹;劉金彪;;對(duì)一株鴨疫里默氏桿菌的分離與鑒定[J];中國(guó)動(dòng)物檢疫;2014年08期

9 呂敏娜,張毓金,黃承鋒;鴨疫里默氏桿菌病的研究進(jìn)展[J];廣東畜牧獸醫(yī)科技;2001年04期

10 熊濤;李自力;畢丁仁;;鴨疫里默氏桿菌的分離與鑒定[J];長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版)農(nóng)學(xué)卷;2006年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前2條

1 陳虹;程安春;汪銘書;;鴨疫里默氏桿菌分子生物學(xué)研究進(jìn)展[A];第四屆第九次全國(guó)學(xué)術(shù)研討會(huì)暨飼料和動(dòng)物源食品安全戰(zhàn)略論壇論文集（下冊(cè)）[C];2008年

2 王連勝;于漣;;溫州地區(qū)鴨疫里默氏桿菌的分離、鑒定及藥敏試驗(yàn)[A];浙江省免疫學(xué)會(huì)第五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2004年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 王小蘭;鴨疫里默氏桿菌毒力基因的鑒定及功能分析[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

2 王曉佳;不同血清型的鴨疫里默氏桿菌全基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 俞慧;從基因組水平分析鴨疫里默氏桿菌強(qiáng)弱菌株間的差異基因[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

2 鄒潔馳;鴨疫里默氏桿菌脂多糖單克隆抗體制備、突變株篩選及生物學(xué)特性研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

3 范國(guó)博;鴨疫里默氏桿菌pfs基因的功能研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

4 邢林林;鴨疫里默氏桿菌紅霉素耐藥機(jī)制的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

5 喻桂婧;鴨疫里默氏桿菌脂多糖隨機(jī)突變株的篩選及M949_1360基因生物學(xué)特性分析[D];揚(yáng)州大學(xué);2016年

6 張鵬云;鴨疫里默氏桿菌B739_1208基因的功能鑒定及其突變株的毒力評(píng)估[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

7 廖何斌;鴨疫里默氏桿菌TonB蛋白的功能研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

8 姜安安;兩株鵝源鴨疫里默氏桿菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

9 孫冰清;鴨疫里默氏桿菌培養(yǎng)上清中分泌蛋白的初步研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

10 丁云竹;鴨疫里默氏桿菌雙重PCR方法的建立及50S L27轉(zhuǎn)座子插入突變株的部分生物學(xué)特性分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

，

本文編號(hào)：1757126